Evaluación de protocolos de recuperación celular de Lactococcus lactis GV103, microencapsulado

La microencapsulación de probióticos es una estrategia eficaz para aumentar la estabilidad celular frente a procesos tecnológicos y condiciones gastrointestinales. Sin embargo, la verificación de la viabilidad de estas células depende directamente del protocolo de recuperación elegido, ya que la liberación de la bacteria de la matriz puede interferir con los resultados. Así, el objetivo de este estudio fue evaluar los métodos de verificación de la viabilidad de la cepa potencialmente probiótica Lactococcus lactis GV103, microencapsulada en una matriz de grasa vegetal asociada a emulsión de goma arábiga liofilizada, frente a protocolos con y sin ruptura activa de las cápsulas. Se probaron dos protocolos para la cuantificación; donde el Protocolo 1 consistió en rehidratación en agua de peptona al 0,1%, con incubación a 37 °C durante 10 minutos seguida de agitación vigorosa en un vórtice, sin aplicación de agentes de ruptura,  el Protocolo 2 utilizó citrato de sodio al 2% (pH 7,0) como agente de liberación, asociado a incubación a 42-44°C. Posteriormente, se realizaron diluciones seriadas en agua de peptona al 0,1% y conteo de placas superficiales, con agar Man, Rogosa y Sharpe (MRS), incubado a 37°C durante 48 horas. Los resultados mostraron que el Protocolo 1 tuvo los recuentos más altos, siendo de 9,27 log UFC/mL, lo que indica que la rehidratación fue suficiente para liberar las células microencapsuladas sin causar daños significativos. El protocolo 2 tuvo recuentos más bajos que el protocolo anterior, siendo de 8,62 log UFC/ml, lo que sugiere que los métodos más complejos no necesariamente dan como resultado una mejor recuperación celular e incluso pueden comprometer la viabilidad bacteriana. Al elegir un protocolo, se debe considerar no solo la eficiencia de la ruptura de la cápsula, sino también la preservación de la integridad celular de las células probióticas. La conclusión es que el protocolo de rehidratación con agua de peptona combinado con agitación mecánica (Protocolo 1) fue el método más adecuado para verificar la viabilidad de Lactococcus lactis GV103 microencapsulado en emulsión de grasa vegetal y goma arábiga, ofreciendo resultados superiores a los protocolos de ruptura química.