O sistema UHT (Ultra High Temperature) permite a conservação e o prolongamento da vida útil do leite à temperatura ambiente. A maioria dos defeitos que limita a aceitabilidade de produtos UHT resulta de alterações físicas, químicas e enzimáticas durante a estocagem causadas pelo uso de leite cru com baixo padrão de qualidade. O emprego de leite cru contaminado com bactérias esporuladas do gênero Bacillus constitui um dos principais entraves para obtenção de leite UHT de acordo com os padrões de qualidade. Essas bactérias produzem enzimas proteolíticas e lipolíticas termoestáveis associadas à perda de qualidade da matéria-prima e consequente redução da vida útil do produto com prejuízos significativos à indústria de laticínios. Objetivou-se identificar bactérias esporuladas isoladas de leite UHT de 20 marcas processadas em indústrias do Estado de Minas Gerais, comercializadas nos mercados de Juiz de Fora e Rio Pomba. Foram identificados por meio do sistema API50CH 47 isolados, dentre esses Bacillus subtilis / amyloliquefaciens (68%), Bacillus pumilus (4%), Bacillus licheniformis (6%) e Bacillus megaterium (2%). As espécies identificadas são reconhecidamente formadoras de biofilmes e algumas consideradas patogênicas. Assim, reforça-se a importância do monitoramento dos procedimentos de higienização, do binômio tempo/temperatura e da implementação de padrões microbiológicos para o leite cru destinado ao processamento UHT.