O tambaqui é uma espécie de peixe de água doce nativa da Bacia Amazônica com expressiva produção em cativeiro nas regiões Norte e Nordeste do Brasil. O objetivo deste trabalho foi avaliar os lipídios e a composição de ácidos graxos de filé e cabeças de tambaquis. Os peixes utilizados para essa pesquisa foram obtidos em quatro pisciculturas. A carne do tambaqui foi submetido ao processo de liofilização e após o processo foi realizado a extração de lipídios. Os ésteres metílicos de ácidos graxos foram separados em cromatógrafo a gás com um detector de ionização de chama. As concentrações foram determinadas através da integração das áreas dos picos e os resultados expressos em porcentagens de área relativa de lipídios totais. Foram detectados 33 ácidos graxos nos lipídios totais extraídos do filé e da cabeça. Os ácidos graxos majoritários detectados no filé e cabeça dos peixes cultivados, em ordem decrescente de percentagem para filé e cabeça foram: oléico (34,01%; 33,58%), palmítico (25,70%; 25,58%), linoléico (13,93%; 14,46%) e esteárico (10,16%; 10,10%). Não houve diferença significativa (p0,05) entre os ácidos graxos majoritários para filé e cabeça. Comparando o filé e a cabeça dos peixes de cultivo, em relação aos principais ácidos graxos e os de importância nutricional, observou-se que ocorreu diferença significativa (p0,05) somente para o araquidônico. Não houve diferença significativa (p<0,05), entre o filé e cabeça de tambaqui em relação aos grupos de ácidos graxos saturados, monoinsaturados e poli-insaturados. O somatório dos ácidos graxos saturados variou de 38,64% a 39,35%, valores encontrados em filé e cabeça de tambaqui, respectivamente. O filé apresentou maior valor do somatório de ácidos graxos poli-insaturados, o valor do ácido araquidônico foi decisivo para esse resultado. O ácido graxo eicosapentaenóico e docosaexaenóico apresentaram maior valor percentual em filé. A composição de ácidos graxos de filé e cabeças foi semelhante.