O pescado é um alimento saudável, porém altamente suscetível a deterioração, devido a sua composição química e o pH próximo a neutralidade, favorecendo o desenvolvimento microbiano. As técnicas moleculares possibilitam a obtenção de resultados confiáveis e rápidos para detecção de patógenos com identificação por PCR. O objetivo deste trabalho foi analisar a presença de Staphylococcus aureus em pintado (Pseudoplatystoma corruscans), comercializado na cidade de Cuiabá-MT, utilizando técnicas moleculares para a sua detecção. As amostras foram adquiridas em mercados, peixarias e feiras em Cuiabá, Mato Grosso, Brasil. Cerca de 25g do tecido de cada peixe resfriado foi coletado e acondicionado em caixas isotérmicas e encaminhadas para o laboratório de Genética Animal da Universidade Federal de Mato Grosso, campus Cuiabá-MT. Das amostras foram feitas triplicatas e transferidas para frascos com 225 mL de água peptonada estéril a 0,1%, homogeneizadas e feitas diluições seriadas até 10-3. Colocou-se alíquotas de 0,1 mL (100 µL) de cada diluição em placas de Petri contendo o meio de cultura ágar mac conkey e levadas a estufa a 35ºC /24 horas. A seguir, fez-se o enriquecimento das colônias em caldo infusão cérebro e coração, em estufa a 35ºC por 18 horas. Para extração do DNA utilizou-se o kit de extração RTP® Bactéria DNA Mini Kit (STRATEC Molecular) seguindo as instruções do fabricante. A reação em cadeia da polimerase (PCR) foi realizada utilizando primer espécie específico (R; 5’- ATG AAG TCA AAT AAA TCG CT 3’ F; 5’ - TTT GGT GAA AAA TAC TTC TC -3’) - 458pb. para amplificar sequencias do gene nuC .Das 9 amostras analisadas, todas estavam ausente para essa bactéria, o que indica que não houve falha de caráter higiênico sanitário na manipulação desse pescado, podendo este ser classificado como produto em condições sanitárias adequadas ao consumo.