Dentre os biocatalisadores mais utilizados encontram-se as lipases, enzimas pertencentes à classe das hidrolases e que se destacam graças à capacidade de catalisar reações tanto em meio aquoso, quanto em meio orgânico. Assim, o objetivo deste trabalho foi comparar a atividade hidrolítica da Lipozyme TL IM e Lipozyme RM IM, em diferentes óleos comerciais. A atividade das lipases foi determinada empregando-se como substrato uma emulsão dos diferentes óleos vegetais e água (50%), à 37ºC, por 5 minutos. Os ácidos graxos liberados foram titulados com HCl (0,05M). Os resultados de atividade hidrolítica da Lipozyme TL IM foram 8365,88 ± 235,04 U/g (azeite de oliva), 7406,41 ± 230,11 U/g (girassol), 7318,97 ± 307, 43 U/g (semente de uva), 6534,70 ± 234,52 U/g (canola), 5031,47 ± 66,33 U/g (algodão) e 3934,14 ± 69,06 U/g (soja). Para a Lipozyme RM IM, os valores de atividade hidrolítica foram 699,39 ± 53,53U/g (azeite de oliva), 483,31 ± 31,49 U/g (girassol), 435,07 ± 51,99 U/g (semente de uva), 423,78 ± 18,75 U/g (canola), 407,97 ± 16,26 U/g (algodão) e 440,04 ± 20,74 U/g (soja). Independentemente do óleo empregado, a Lipozyme TL IM forneceu valores de atividade superiores aos obtidos empregando-se a Lipozyme RM IM. Além disso, os maiores valores foram alcançados com azeite de oliva e óleo de girassol. A atividade da Lipozyme RM IM parece não ter sofrido influência dos óleos vegetais, uma vez que encontram-se em uma faixa reduzida (400 a 700 U/g). As diferentes composições em ácidos graxos dos óleos vegetais avaliados parece ter influenciado apenas a atividade da Lipozyme TL IM, uma vez que a faixa de atividade hidrolítica variou de 3900 a 8500 U/g. Os valores elevados de atividades hidrolítica da Lipozyme TL IM indicam que esta lipase, em comparação à Lipozyme RM IM, apresenta melhor ação hidrolítica nos substratos avaliados.