Curdulana é um exopolissacarídeo sintetizado por bactérias, com amplo potencial de aplicação na indústria alimentícia, farmacêutica e química. Esta pesquisa objetivou avaliar a produção de curdulana por Agrobacterium sp. IFO 13140 imobilizado em esponja vegetal, alginato e esponja vegetal com alginato. A otimização da imobilização e da produção de curdulana em esponja vegetal foi realizada e comparada com a produção por células livres. Também foram avaliadas a estabilidade de armazenamento e operacional das células imobilizadas. Não houve diferença estatística na produção de curdulana quando a bactéria foi imobilizada nas diferentes matrizes. As melhores condições de imobilização foram 50 mg de célula, 200 rpm e 72 h de imobilização, e proporcionaram uma produção de curdulana 1,34 vezes superior àquela obtida por células livres. A maior produção de curdulana por células imobilizadas, sob diferentes velocidades de agitação do meio de produção, ocorreu a 150 rpm e foi de 19,45 g.L-1. Após 240 dias de armazenamento a 4 °C, a produção de curdulana foi de 12,72 g.L-1, 95,6% daquela obtida após 60 dias de armazenamento. A estabilidade operacional foi avaliada em 6 ciclos consecutivos de 10 dias cada. Até o quarto ciclo as células imobilizadas mantiveram 87,4% da produção obtida no primeiro, e apresentaram uma redução de 29,43% na produção somente a partir do quinto ciclo, enquanto as células livres não produziram curdulana a partir do segundo. Esta pesquisa mostrou que a técnica de imobilização de células íntegras em esponja vegetal é promissora para a produção de curdulana por Agrobacterium sp. IFO 13140.