O Pequi (Caryocar brasiliense Camb.) é um fruto muito rico em óleo, proteínas e carotenóides. O óleo é considerado de excelente qualidade, pois sua maior parte está constituída por ácidos graxos insaturados. Extratos e óleos essenciais de plantas têm se mostrado eficientes no controle de uma grande variedade de micro-organismos, incluindo fungos, leveduras e bactérias. Desta forma, estudou-se o potencial antimicrobiano do óleo e do extrato hidroalcoólico do pequi e a determinação da concentração inibitória mínima (MIC) desses compostos. A extração do óleo foi realizada por extração por solvente a frio; o teste de suscetibilidade e o método de difusão em disco foi realizado de acordo com o Clinical and Laboratory Standards Institute. O presente estudo demonstrou que o extrato hidroalcoólico do pequi apresentou potencial antimicrobiano na inibição de Staphylococcus aureus e Salmonella cholerestasus. O óleo de pequi apresentou inibição apenas para a Salmonella cholerestasus. Testes de determinação da MIC do óleo foi conduzido apenas para os micro-organismos cuja inibição fora detectada previamente, apresentando a MIC de 1,562 mg/mL, resultado que se apresenta entre a atividade fraca e moderada, uma vez que considera-se como de atividade moderada aqueles que apresentaram MIC entre 0,6 e 1,5 mg/mL; e de fraca atividade os que apresentaram MIC acima de 1,6 mg/mL. Mesmo assim, o óleo de pequi apresentou potencial satisfatório para o desenvolvimento de antimicrobianos naturais.