INVESTIGAÇÃO DA BIOTRASNFORMAÇÃO ENZIMÁTICA DA ENGELETINA

As biotransformações desempenham papel cruciais para modificar estruturas químicas naturais e os fungos endofíticos da Amazônia são fontes promissoras de enzimas com essa finalidade. Este estudo focou na engeletina, um composto fenólico do mari-mari (Cassia leiandra Benth) um ingá Amazônico conhecido por suas propriedades anti-inflamatórias e antiprotozoárias. Para explorar o potencial biotransformador, utilizamos enzimas produzidas por linhagens de fungos endofíticos isolados da Amazônia. As linhagens incluem Xylaria sp., Colletotrichum sp. isolate e Trichoderma inhamatum. Esses microrganismos produziram extratos enzimáticos contendo lacase, protease e celulase que foram liofilizados. Preparamos uma solução tampão fosfato-salina (PBS) por dissolução de NaCl, KCl e KH2PO4 em água destilada, que foi autoclavada a 120 oC por 15 min. No procedimento de biotransformação 5 mg da enzima em foi solubilizada em 10 mL do tampão PBS e adicionado 900 μL dessa solução em microtubos de 2 mL. A esses tubos, acrescentou-se 100 μL da solução de engeletina em DMSO a uma concentração de 6 μg/mL. As coletas das amostras foram coletadas a cada 2 h após o início, totalizando 4 h. Em seguida, adicionou-se 200 μL da solução de engeletina + DMSO aos tubos, permitindo a análise contínua do experimento com a engeletina ao longo do tempo. As análises químicas foram conduzidas em espectrômetro de massas TSQ Quantum Access, monitorando a faixa de m/z 100-1000 com fonte APCI, nos modos positivo e negativo, através de injeção direta. Os resultados revelaram que, mesmo com a intensa ionização da engeletina no modo negativo, os picos permaneceram constantes em todas as amostras, envolvendo as enzimas avaliadas. As enzimas testadas não conseguiram biotransformar a engeletina ao longo de 8 horas, mantendo sua estrutura inalterada. Portanto, apesar do potencial biotransformador dos fungos endofíticos da Amazônia e suas enzimas, a engeletina se mostrou resistente a alterações no experimento, preservando sua estrutura molecular original.