A imobilização enzimas constitui uma das estratégias para aplicação destes biocatalisadores em processos industriais. O alginato é um biopolímero que, devido a sua constituição química, é considerado favorável para imobilização de enzimas. As peroxidases se destacam no cenário industrial devido à versatilidade de aplicações possíveis. Peroxidases de fontes vegetais são alternativas menos onerosas, comparadas às peroxidases comerciais atualmente disponíveis. Neste sentido, o objetivo do trabalho foi imobilizar a peroxidase de rabanete (Raphanus sativus L.) (PRB) em microesferas de alginato de cálcio pela técnica de adsorção física e caracterizar o biocatalisador imobilizado por espectroscopia de infravermelho por transformada de fourrier (FTIR). O extrato bruto de rabanete foi utilizado como fonte de peroxidase. A atividade peroxidásica foi determinada pelo monitoramento espectrofotométrico da oxidação de guaiacol. O rendimento de imobilização foi calculado considerando o número de unidades de enzima imobilizadas em relação ao número de unidades de enzimas oferecidas. O efeito do carregamento enzimático foi avaliado na faixa de 1,3-6,5 mg de proteína/g suporte. O pH ótimo da enzima livre e imobilizada foi investigado considerando uma faixa de pH de 3,0-9,0. O carregamento de 3,9 mg proteína/g suporte resultou em maior rendimento de imobilização: 7,4 ±1,08 %. O pH ótimo de atuação da PRB livre foi 6,0, enquanto na forma imobilizada foi 7,0. A alteração do pH ótimo da enzima pode ser atribuída a provável mudança conformacional na estrutura da enzima decorrente da interação eletrostática enzima-suporte no micro e macro ambiente de imobilização. A caracterização por FTIR da enzima livre, suporte e BI mostrou bandas características dos seguintes grupamentos COO- (suporte) N-H (enzima) além de bandas vibracionais características de ambos os materiais presentes no BI, confirma assim, imobilização da enzima no suporte. A imobilização de peroxidase de rabanete em alginato de cálcio possibilita reduzir o custo do processo e a reutilização do biocatalisador.