O leite materno é um alimento nutricional completo para o recém-nascido. Além de reforçar o sistema imunológico também exerce uma ação preventiva contra alterações funcionais e metabólicas do bebê. O incentivo à amamentação e o fortalecimento dos Bancos de Leite Humano (BLH) estão entre as diretrizes da política pública de saúde Brasileira. Este trabalho utilizou métodos descritivos e observacionais, baseado no regulamento técnico da Agência Nacional de Vigilância Sanitária (RDC n° 171, 4 de setembro de 2006), para levantamento de informações sobre a coleta, manipulação, processamento e dispensação do leite humano durante a visita a um BLH. Foram observadas deficiências básicas nas boas práticas de manipulação do leite humano desde a sua coleta até a dispensação, como, por exemplo, o descumprimento da higienização correta das mãos, a falta de procedimento para higienização do seio da mãe e o treinamento insatisfatório dos profissionais. Observou-se também falta de padronização, controle e periodicidade nos procedimentos de análises microbiológicas no ambiente de trabalho e na etapa de processamento do leite humano. O relatório aponta a necessidade de uma revisão e adequação das boas práticas de manipulação visando garantias da qualidade do leite humano processado nesse ambiente para um atendimento íntegro aos lactentes.