O processo de produção de biodiesel via rota enzimática mostra-se vantajoso pela inexistência de rejeito aquoso alcalino ou ácido, por produzir uma menor quantidade de contaminantes e ter bons rendimentos. Objetivou-se realizar a esterificação enzimática do óleo de soja com as enzimas comercias (Lipozyme TL IM e Lipozyme RM IM) para a formaçâo de ésteres etílicos de ácidos graxo. Para avaliação do produto obtido pela catálise enzimática, as metodologias de cromatografia de camada delgada, índice de acidez, densidade e índice de iodo foram empregadas. A densidade apresentada foi inferior a densidade do óleo de soja (972,09 kg . m-3) ocorrendo a esterificação. O índice de retenção das amostras de biodiesel enzimático foi igual ao índice de retenção da amostra controle (0,83) e diferente do óleo de soja (0,70). As enzimas estudadas mostraram-se eficientes na esterificação enzimática do óleo de soja para obtenção de ésteres.