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Os cafeeiros conhecidos como Híbrido de Timor (HdT), resultantes do cruzamento natural entre Coffea arabica e Coffea canephora, são amplamente reconhecidos como uma valiosa fonte de genes de resistência em programas de melhoramento genético do cafeeiro. Por serem tetraploides, cruzam-se facilmente com cultivares de C. arabica, favorecendo a introgressão de características de interesse agronômico. A conservação dos acessos de HdT em Bancos Ativos de Germoplasma (BAG) é fundamental para garantir a utilização e a preservação da variabilidade genética. A partir de acessos introduzidos de diferentes origens, foi estruturado o BAG de HdT da Universidade Federal de Viçosa (BAG/UFV). Posteriormente, com sementes derivadas de autofecundação desses acessos, foi criado o Banco de Germoplasma de Café da Empresa de Pesquisa Agropecuária de Minas Gerais (BGC/EPAMIG). Juntos, esses bancos compõe o maior acervo de HdT do mundo. Apesar do reconhecido valor desses acessos, a caracterização molecular ainda é limitada. O conhecimento da diversidade genética é essencial para complementar as avaliações fenotípicas, permitindo a identificação e seleção de genótipos portadores de alelos favoráveis. Além disso, possibilita a detecção de indivíduos geneticamente similares, evitando redundâncias no BAG e otimizando os recursos financeiros destinados à sua manutenção. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi caracterizar a diversidade genética de parte dos acessos de HdT. Para isso, 11 marcadores moleculares distribuídos aleatoriamente ao longo do genoma e 92 acessos que compõe a duas coleções, sendo 23 acessos de HdT oriundos do BAG/UFV e três plantas representativas das progênies oriundas do BGC/EPAMIG foram utilizados. Por meio desses marcadores, 23 alelos foram detectados, com variações de 1 a 3 e média de 2,09 alelos por marcador. A análise de agrupamento pelo método UPGMA, utilizando ponto de corte definido pelo teste de Mojena, demonstrou que as coleções consistem em genótipos com alta variabilidade genética, agrupados em 13 grupos distintos. Os grupos IV e V apresentaram o maior número de indivíduos, com 19,5 % e 26 % dos acessos, respectivamente. Quatro acessos (MG 377-34-1, MG 377-34-1, MG 380-52-2, UFV 376-57) não foram agrupados. Alguns indivíduos não foram separados, apresentando perfis moleculares idênticos, demonstrando que são geneticamente muito próximos. Entre os indivíduos estão o MG 427-01-1 e MG 427-09-1, que possuem o mesmo perfil molecular, assim como MG 427-09-2 e MG 427-09-3. Além disso, a análise de diversidade demonstrou um padrão divergente de relação entre alguns dos parentais e suas progênies, onde ao menos um descendente se distanciava significativamente do progenitor. Como por exemplo, o acesso parental UFV 377-24 e um de seus descendentes, MG 377-24-3, agrupados no grupo VIII, enquanto os outros dois descendentes MG 377-24-1 e MG 377-24-2 foram alocados em grupos distintos (grupo III e grupo VII, respectivamente). Os resultados obtidos demonstraram que o desenvolvimento BGC/EPAMIG através de sementes oriundas do BAG UFV ampliaram o pool gênico e a diversidade de acessos de HdT. Esses resultados fornecerão subsídios para seleção de genitores, aumentando as chances de cruzamentos favoráveis e a otimização do desenvolvimento de cultivares de C. arabica.
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