Estudo do efeito sequestrante PVP-Fenol na determinação do teor de proteína pelo método de Lowry

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Detalhes
  • Tipo de apresentação: e-Pôster
  • Eixo temático: Química Analítica - ANA
  • Palavras chaves: polyvinylpyrrolidone; Fenol; método de Lowry; teor de proteína; (PVP-40;
  • 1 UNIVERSIDADE DO ESTADO DO RIO DE JANEIRO
  • 2 Universidade Federal do Rio de Janeiro
  • 3 Laboratório Extratos Alergênicos

Estudo do efeito sequestrante PVP-Fenol na determinação do teor de proteína pelo método de Lowry

Daniel Vasconcelos

UNIVERSIDADE DO ESTADO DO RIO DE JANEIRO

Resumo

O método de Lowry é rotineiramente utilizado em laboratório de análise para determinação do teor de proteínas, tendo os compostos fenólicos como substancias interferentes1. Contudo, o polímero polivinilpirrolidona (PVP) pode formar complexos com compostos fenólicos, permitindo sua remoção e conferindo estabilidade à proteína. Objetivo: O presente estudo tem por objetivo avaliar o efeito do polímero PVP, como agente sequestrante de fenol em amostra proteica, mediante a quantificações pelo método de Lowry2. Metodologia: Foram construídas curvas padrão de albumina soro bovino (BSA), nas concentrações de 5, 10, 25, 50, 75, 100 µg/mL, em matriz contendo 0,032 mmol/mL de fenol e PVP-40 (3, 10, 25 % (m/m)). Os experimentos foram avaliados, observando as amostras controle padrão (ausência de fenol) em relação aos experimentos contendo: BSA, fenol e PVP-40. Resultados e Discussão: A ausência de PVP-40 impossibilitou a obtenção da densidade óptica (D.O) (Figura 1(a)) pela turvação do meio, tendo em vista a formação óxido de tungstênio e óxido de molibdênio. Para a concentração de 5 µg/mL da curva analítica, foram obtidos os menores erros relativos, nos valores de 1,8% e 5,6 %, quando submetidos aos percentuais de 25% e 3% de PVP-40, respectivamente. Esses resultados sugerem que nessas condições, houve sequestro de fenol pelo polímero, minimizando interações entre fenol e o reagente Folin-Ciocalteu (turvação). Os baixos coeficientes de correlação das curvas analíticas (Figura 2 (b), (c) e (d)) em concentrações de proteína acima de 5 µg/mL, sugerem haver interações proteína-fenol, conforme relatado por Winters e Minchin (2005). Isso justificaria a diminuindo a D.O, pela minimização da interação proteína e Folin-Ciocalteu. Esses resultados apontam que para cada concentração da curva analítica (teor de proteína) há a necessidade de ajuste do percentual em massa do polímero, (para o valor fixo de fenol, 0,032 mmol), fato que está sendo investigado em laboratório. Conclusão: A aplicação de PVP permitiu uma boa aproximação em relação a amostra sem fenol, sendo um método promissor, porém requer ainda processo de validação, etapas que ocorrerão no curso nesta pesquisa.

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