CHARACTERIZATION OF INFLAMMATORY MECHANISMS INDUCED BY METALLOPROTEINASES AND PHOSPHOLIPASE A2 FROM BOTHROPS LEUCURUS VENOM

O envenenamento por cobras Bothrops desencadeia uma resposta inflamatória pronunciada, levando a manifestações clássicas, incluindo dor, edema, dano endotelial, necrose no local da picada e migração de leucócitos. Os sintomas observados são devidos à composição do veneno, que consiste principalmente de metaloproteinases (SVMPs), serina proteinases (SVSPs), fosfolipases A2 (PLA2), desintegrinas e lectinas do tipo C. Os papéis dessas toxinas na resposta inflamatória ainda não são totalmente compreendidos. Portanto, este estudo teve como objetivo avaliar a produção de mediadores inflamatórios por macrófagos tratados com proteínas isoladas do veneno de Bothrops leucurus. Para avaliar se essas toxinas poderiam modular a ativação de macrófagos, células RAW 264.7 foram pré-estimuladas com Pam3CSK4 ou LPS, que são agonistas dos receptores Toll-like (TLRs) 2 e 4, respectivamente, e então tratadas com Leucurolisina-a (Leuc-a), Leucurolisina-B (Leuc-B) e PLA2. Após 24 horas, os sobrenadantes das células foram coletados para quantificação de IL-6, IL-1β e TNF-α por ELISA. Os resultados mostraram que todas as toxinas levaram à redução da produção de TNF-α induzida por LPS e Pam3CSK4. Além disso, Leuc-a reduziu a produção de IL-6 induzida por agonistas TLR2 e 4. Leuc-B reduziu a produção de IL-6 induzida por LPS enquanto aumentou a produção de IL-6 induzida por Pam3CSK4. As toxinas induziram um ligeiro aumento na produção de IL-1β quando os macrófagos foram pré-tratados com Pam3CSK4 ou LPS. As análises de atividade enzimática de SVMPs demonstraram a capacidade de Leuc-a e Leuc-B de clivar as citocinas TNF-α e IL-6. Em conclusão, nossos dados sugerem que SVMPs e PLA2 podem estar envolvidos na resposta inflamatória induzida pelo veneno de B. leucurus. A modulação da ativação de macrófagos, particularmente por Leuc-a, um SVMP-PI não hemorrágico, destaca o forte potencial biotecnológico desta toxina para o tratamento de doenças inflamatórias.