Análise da expressão de microRNAs 612 e 637 em câncer de cabeça e pescoço

O câncer de cabeça e pescoço vem aumentando significativamente com a incidência elevando-se em cerca de 680 mil casos e 500 mil mortes por ano no mundo, inclusive esses números expressam a relevância da doença para a saúde pública. Vários fatores genéticos, ambientais e de estilo de vida podem contribuir para um maior risco de desenvolvimento de câncer em seres humanos, um desses fatores é a inflamação crônica, que contribui para a tumorigênese por propiciar mutações gênicas. Nesse contexto, a inflamação atua como uma ferida que não cicatriza, exigindo que as células se renovem constantemente, acelerando a divisão celular, o que aumenta o risco de mutações e transformação neoplásica. O ambiente inflamatório pode contribuir para a progressão do tumor devido a ativação do estroma, liberação de fatores de crescimento, angiogênese e ativação de metaloproteinases de matriz (MMP), para a migração de células imunes ao local da inflamação, e esses efeitos favorecem a proliferação celular e metástase tumoral. Foi relatado que diferentes vias gênicas, mediadores e células inflamatórias são significativamente mais expressos no câncer de cabeça e pescoço, nesse sentido é de potencial interesse a busca de mediadores que modulam a expressão dessas vias, para serem considerados possíveis marcadores moleculares. Ultimamente, os micros RNAs (miRNAs) têm sido de grande relevância na pesquisa do câncer devido ao seu papel proeminente como reguladores de diversos genes, eles também estão implicados em todas as fases do processo tumoral e inflamatório, incluindo a produção de diversas moléculas sinalizadoras. Os miRNAs também podem desempenhar um papel importante na metástase, promovendo ou inibindo a migração e invasão de células tumorais, regulando fatores de transcrição e de metaloproteinases de matriz (MMPs), como exemplo destacamos os miRNA-612 e miRNA-637. Por isso, esse estudo tem como objetivo avaliar a expressão dos miRNA-612 e miRNA-637 com o intuito de descobrir possíveis alvos que poderiam ser utilizados como biomarcadores moleculares no câncer de cabeça e pescoço. Para isso, serão cultivadas as linhagens celulares HeP-2 (carcinoma de células epidermoides de laringe) e SCC-25 (carcinoma de células epidermoides de língua), mas também farão parte desse projeto três amostras de tecido de câncer de cabeça e pescoço que serão cedidas pelo Ambulatório de Câncer de Cabeça e Pescoço da Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto (FAMERP). Então será realizada a extração de RNAs, confecção de cDNA dos miRNAs de todas as amostras e por último, analisados os valores de expressão gênica por PCR quantitativa. A quantificação relativa dos níveis de expressão dos miRNAs será calculada utilizando o método 2^-∆∆Ct. Espera-se que os miRNAs estudados sejam diferencialmente expressos nas amostras de câncer de cabeça e pescoço, podendo ser utilizados como possíveis biomarcadores moleculares nesse tipo de câncer.