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DETERMINAÇÃO DO KNOCKDOWN DOS GENES METILTRANSFERASE, DESACETILASE E PROTEÍNA DE LIGAÇÃO AO CREB DO Schistosoma mansoni NOS ESTÁGIOS DO DESENVOLVIMENTO PARA ANALISAR O SILENCIAMENTO DA EXPRESSÃO GÊNICA E A BUSCA DE NOVOS ALVOS TERAPÊUTICOS
GABRIELA DE FREITAS CRUVINEL
UNICAMP
Agora você poderia compartilhar comigo suas dúvidas, observações e parabenizações
Crie um tópicoOs genes do S. mansoni analisados, são o Smp_025550 - proteína arginina N-metiltransferase, Smp_069380 - histona putativa deacetilase 4, 5 e Smp_105910 - proteína 1 de ligação ao CREB (SmCBP1). A análise dos genes foi realizada através do método de qRT-PCR, avaliando a expressão de cada um durante os 5 estágios de vida do parasita: cercária, esquistossômulo de 24 horas, de 3 dias, de 6 dias e verme adulto. Os três genes são codificadores de proteínas e estão ligados a atividades de modificações pós-traducionais de histonas no organismo do parasita. A enzima Metiltransferase (smp_025550), quando inibida pelos fármacos A366 e GSK343, há inibição do desenvolvimento do esporocisto e o GSK343 também diminui a oviposição dos vermes adultos; a Deacetilase (Smp_069380), quando inibida por SmI-148 e SmI-558, diminui a produção de ovos e prejudica a morfologia do sistema reprodutivo do parasita; e a SmCBP1 - Acetiltransferase (Smp_105910), possui a função de acetilar histonas, interagir fisicamente com receptores nucleares do S. mansoni, e coativar a transcrição em um sistema heterólogo. O projeto apresenta o desenho dos primers que serão utilizados no experimento de síntese do dsRNA, que irá silenciar os genes do Schistosoma mansoni através do método RNAi e a metodologia utilizada; a análise filogenética e de domínios das proteínas que mostram a conservação dos domínios, englobando os 3 genes do estudo. A pesquisa foi realizada in sílico, através de softwares.
Apoio/Financiamento da Pesquisa: PIBIC/CNPq - AF
Guilherme Augusto Sanches Roque
Gostaria de saber o porquê da escolha desses genes e se há algum dado que possa prever o que o silenciamento deles pode causar no parasita.
RAQUEL LISZBINSKI
Olá Gabriela,
Achei muito interessante a temática do trabalho, parabéns pela pesquisa! Espero que renda bons frutos
Sugestão: O título está muito longo, o ideal é condensar para ficar mais simples e objetivo
Senti falta de uma sessão de introdução no PDF do resumo.
Como serão feitos os testes in vitro?
GABRIELA DE FREITAS CRUVINEL
Muito obrigada pelas observações e pela sugestão, Raquel.
Os testes in vitro serão realizados através de incubações nos esquistossômulos e/ou vermes adultos, em relação aos estágios expressos de cada gene.
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GABRIELA DE FREITAS CRUVINEL
Os genes foram escolhidos a partir da expressão deles em relação aos estágios de vida do parasita no heatmap realizado em 2019, através de análises de RT-PCR.
O silenciamento especificamente nestes genes não foi previsto anteriormente, porém outros genes do S. mansoni foram nocauteados e o resultado foi de dismorfia corporal e/ou sexual, atrapalhando o desenvolvimento do parasita, bem como a postura de ovos, previsto em revisão bibliográfica.
Guilherme Augusto Sanches Roque
Obrigado! Parabéns pelo trabalho!