Muito obrigada!!

Olá Roberto, muito obrigada. O extrato não foi testado, pois a pesquisa buscou se aproximar do processo digestivo semelhante ao fisiológico, de forma que a folha de beterraba passe por todo o processo. As pesquisas realizadas no laboratório, sempre eram questionadas sobre os efeitos dos compostos que resultavam da digestão. Houve o teste em artigos do laboratório, em que o extrato da folha de beterraba apresentou efeito antitumoral em células de câncer de próstata e de colo de útero, mas no presente projeto de pesquisa não houve o teste. 

Sobre a segunda pergunta, após o processo de digestão simulada, o material digerido foi centrifugado e separado em fração líquida e sólida, a ideia proposta foi que a fração líquida seria absorvida no intestino delgado e a sólida, no intestino grosso. Como já havia resultados tanto do teor de fenólicos totais, quanto da capacidade antioxidante da fração líquida, foi feito um extrato com o material sólido para ter uma aproximação do valor que chegaria ao intestino grosso. Além disso, precisávamos saber quanto havia de compostos fenólicos antes da digestão para concluir se causava alguma alteração nessa quantidade após o processo. É importante deixar claro que esses compostos estão sendo identificados e quantificados em outro trabalho. Obrigada!

Olá, muito obrigada!  A digestão simulada é um procedimento proposto por Minekus e seus colaboradores em 2014 (o protocolo chama-se INFOGEST) e apresenta o objetivo de simular o processo de digestão que ocorre no organismo humano. Nele, as amostras são adicionadas a tampões que se assemelham aos fluidos digestivos e enzimas da digestão, além das alterações de pH após passar por cada fase, a oral, gástrica e intestinal (é considerado apenas o intestino delgado). Após isso, há uma inativação de proteínas para que as enzimas adicionadas não alterem nos ensaios seguintes.

No ensaio de proliferação, foi realizada a contagem automática, mas os compostos presentes na folha de beterraba atrapalharam no processo, pois foram contados como células, logo, fizemos apenas a contagem manual. Todas as amostras foram ressuspendidas em mesmo volume no momento da contagem, ou seja, não há esse viés.

A vitexina e seus derivados são os compostos majoritários na folha da beterraba. No presente trabalho não foram testados os efeitos isolados do composto majoritário, pois estamos esperando uma análise que quantificará o composto. A partir dessa informação, um novo ensaio será realizado utilizando o material digerido na concentração já vista tendo efeito e o composto isolado (vitexina) na concentração presente no digerido. Com esse ensaio será possível sugerir o papel da vitexina nos efeitos observados nos ensaios já realizados. Por isso, o grupo possui ensaios programados a partir dos efeitos observados,  além da avaliação das vias moleculares de apoptose, da mTOR, das ciclinas, da expressão de genes envolvidos na resposta antioxidante que vem sendo alvo de outros estudos do grupo. Além disso, serão realizados outros ensaios para afirmar se o efeito obtido no ensaio de proliferação é uma inibição do ciclo celular ou apoptose.

Sim, há outros estudos na literatura, eles utilizaram células de câncer cervical, (DOI: 10.1002/ptr.7255) e em câncer de próstata (DOI: 10.1002/ptr.7197), mas nenhum deles utilizou material digerido.

Obrigada pelas sugestões!

Olá Juliana, muito obrigada!