Foram estudados os efeitos da complexação de lidocaína com 2-hidroxipropil-β-ciclodextrina (Lido-HP-β-CD) sobre a viabilidade (VC) e proliferação (PC) de células de carcinoma epidermoide de língua humana (SCC9 e SCC25). SCC9 e SCC25 foram expostas a lidocaína (Lido) e Lido-HP-β-CD (11,5 a 1115μg/mL) e testaram-se os efeitos sobre a PC (sulforrodamina B) e VC (MTT). Lido e Lido-HP-β-CD reduziram a VC e PC de SCC9 e SCC25 em relação ao controle (células não tratadas), tendo Lido-HP-β-CD apresentado menor CI50% (p<0,0001) que Lido. HP-β-CD sem lidocaína não alterou PC, mas reduziu VC de SCC9 e SCC25 para 91,61% e 93,64%, respectivamente, (p <0,05 em relação ao controle). Doxorrubicina (controle positivo) foi mais eficaz que Lido e Lido-HP-β-CD em reduzir VC e PC. Lido-HP-β-CD 1115μg/mL potencializou os efeitos citotóxicos in vitro da lidocaina sobre SCC9 e SCC25 e poderia ser um auxiliar terapêutico importante, se forem confirmados in vivo seus efeitos.