BIOLOGIA CELULAR QUANTITATIVA: GEOMETRIA DE NÚCLEOS CELULARES
A técnica de imprinting auxilia na visualização da morfologia nuclear, pois com ela podemos observar diversos parâmetros nucleares (diâmetro, área e volume). Apesar do imprinting ser uma técnica barata muito utilizada para analisar os parâmetros nucleares, ela deforma os núcleos. Outros métodos, como a microscopia confocal, poderiam resolver o problema da deformação, mas são mais caros. Nosso primeiro objetivo foi analisar se há diferença nos parâmetros nucleares quando analisados através de diferentes técnicas para verificar o grau de deformação causado pelo imprinting. Além disso, resultados anteriores de nosso laboratório mostraram que dietas normolipídicas baseadas em diferentes lipídios alteram a fisiologia dos animais. Dessa forma, outro objetivo foi analisar a influência dessas dietas na morfologia dos hepatócitos desses camundongos. Fizemos a coloração/marcação dos hepatócitos de camundongos pela reação de Feulgen, Azul de toluidina ou DAPI (Imprintings/Figado fixado). Concluímos que a técnica utilizada para corar/marcar os núcleos ou o microscópio não altera os dados de área e diâmetro. A técnica mais confiável para medir o volume dos hepatócitos é microscopia confocal. A altura dos núcleos não depende da força utilizada para carimbar os imprintings, e sim do tamanho de cada núcleo. A alimentação influencia no tamanho dos núcleos e na quantidade de células inflamatórias presentes no fígado.