Olá Pablo, parabéns pelo trabalho!

Pensando em mecanismos de ação da LABH, gostaria de lhe perguntar se vocês chegaram a testa-la em células tumorais in vitro?

No modelo in vivo, chegaram:

- a prolongar o ensaio de crescimento tumoral além do 28 dia, como o mesmo protocolo de tratamento com LABH?

- a utilizar outros protocolos de tratamentos com LABH (janelas de tratamento, precoce, tardia)?

Obrigada,

Parabéns ao grupo pelo trabalho, e ao Victor pela apresentação. Reprogramação metabólica no câncer é um tema muito interessante, bem como a linha de pesquisa do grupo. Algumas curiosidades gerais:

1 - No começo do trabalho o grupo faz referência a LDHA, e no meio realiza o silenciamento das duas formas, LDHA e LDHB. Vocês observaram a expressão de LDHB nessas células? Ou, de maneira mais geral, existem dados sobre ela em tumores cerebrais? Visto que LDHB parece converter o lactato em piruvato em normóxia, seria interessante observar a relação com a IDH.

2 - Como foi realizado o ensaio de hipóxia, em câmara de vácuo ou hipóxia química?

3 – O resultado do resgate da morte celular parece bastante significativo, parabéns. Porém, observando o efeito do silenciamento nos astrócitos e em GBM, este último parece ser bem mais sensível. A que vocês atribuem essa diferença, já que astrócitos também parecem recorrer preferencialmente à glicólise? Além disso, fica a sugestão de se utilizar um ensaio alternativo ao MTT para a viabilidade celular nesse caso, já que o silenciamento parece afetar a atividade de desidrogenases mitocondriais.

4 - Considerando que no organismo vivo uma pequena porção da massa tumoral se encontra em hipóxia, como o grupo enxergaria um possível tratamento visando a IDH mutada?

Muito obrigado e parabéns mais uma vez pelo excelente trabalho.

Belo trabalho e excelente apresentação. Parabéns.

Qual o impacto do seu trabalho no cenário clínico a longo prazo? Seu trabalho se encaixaria na busca por biomarcadores de pior prognóstico ou no desenvolvimento de terapias-alvo específicas?

Boa Tarde, Leonardo Fonseca.

Me chamo Gustavo Guimarães e hoje terei o prazer de avaliar o seu estudo. Em um primeiro momento, gostaria de parabenizá-lo pelo belíssimo trabalho. Espero que ao final de nossa interação minha contribuição seja valorosa para a condução do seu projeto.

Farei as perguntas por ordem e em blocos, mas fique à vontade para respondê-las da forma que achar pertinente.

1 – Gostaria de saber como foi realizado o processo de resistência a cisplatina nas células A549. Você comentou que tratou as mesmas com uma baixa concentração de cisplatina durante 3 meses. Qual foi a concentração? Você aumentou a concentração ao longo do processo? Se sim, qual foi os parâmetros que você utilizou para aumentar a concentração da droga? Você mantém a célula incubada com as drogas? Em nosso laboratório possuímos prática na geração de células resistentes e quem sabe podemos trocar alguma experiência quanto ao protocolo.

2 – Você pretende explorar melhor a indução de apoptose, realizando mais experimentos além da expressão das proteínas? Possui interesse em avaliar outros tipos de morte celular?

3 – Para um leigo no estudo dos glicanos farei algumas perguntas básicas. Infelizmente, a sua apresentação travou na hora de demonstrar o resultado dos epítopos de glicanos por citometria de fluxo. Foi possível observar pela figura o aumento de alguns deles, mas não consegui entender os seus nomes, você poderia por favor explicar melhor esse resultado? Como você correlaciona esse evento com o aumento da malignidade e resistência? Quais são as vias de sinalização no qual esses glicanos irão influenciar? Você pretende alterar a expressão dos mesmos e avaliar se ocorre uma reversão da resistência, principalmente em relação as glicosiltransferases (visto que você já avaliou as sialiltransferases)? Notei que a maioria das modificações em glicanos apresentadas estão aumentadas e correlacionadas com o aumento da resistência, saberia me dizer se o inverso ocorre, ou seja, uma redução nessas modificações levando ao aumento da resistência?

4 – Você pretende avaliar a motilidade após o tratamento com a neuraminidase?

Muito Obrigado pelo seu tempo.

Parabéns pelo excelente trabalho. Muitos resultados (trabalho árduo!).

Dúvidas:

O que é considerado fenótipo MDR?

A expressão de Ppg, bem com a atividade do transportador pode variar de acordo com diferentes genótipos. Isso foi considerado?

Qual seria a aplicação prática destes resultados de pesquisa básica?

Mais uma vez, parabéns pelo trabalho!

Cordialmente,

Profa Jamila Perini

Laboratório de Pesquisa de Ciências Farmacêuticas – LAPESF UEZO

Instagram: @lapesf.uezo

Boa Tarde Vitória

Parabéns pelo seu trabalho.

Você poderia explicar melhor sobre os ciclos fúteis? Qual seria a demanda para esses ciclos?

Não sei se entendi muito bem, mas a UCP2 bombeia lipídeos para mitocôndria? Poderia comentar melhor?

Vocês avaliaram a morfologia das células metastáticas após incubação com genipin? Acho que seria interessante avaliar a presença de corpúsculos lipídicos (essas organelas estão aumentadas em células metastáticas) uma vez que ocorre alterações no metabolismo lipídico após incubação com genipin.

Boa tarde Vitória. Qual controle vocês utilizaram na verificação da influência de diferentes tipos de lipídeos na taxa de calor das linhagens?

Parabéns pelo trabalho. Queria saber se outros tipos de heparina com maior potencial anticoagulante que o LABH foram testadas como anti metastáticas.

Dear author,

The work seems to be very interesting. Could you please share your video presentation?

All the best

Fábio

Boa tarde! Gostaria de saber se os efeitos antitumorais da heparina não relacionados ao efeito anticoagulante já foram caracterizados. Você sabe dizer como a heparina de baixo potencial anticoagulante poderia estar atuando?

Parabéns pelo trabalho. Os resultados são bastante interessantes e promissores. Gostaria de saber se vocês já sabem o mecanismo de ação da LABH? 

1 - Quais os principais achados do trabalho que podem contribuir para o tratamento da leucemia mielóides?

2 - Quais serão os próximos passos para comprovação da hipótese? Não seria necessário trabalhar com inibibdores da HKII?

Boa tarde Jessica,

Primeiramente parabéns pelo trabalho. Vi que você está fazendo sua iniciação científica. Você participou de todo o processo desse trabalho? Vocês estão de parabéns pela abordagem e o conjunto de técnicas utilizados para responder a pergunta do projeto.

Eu queria lhe perguntar se já existem ensaios clínicos para terapias direcionadas a Hexoquinase II no tratamento de leucemia ou outros tipos tumorais.

Olá, Vitória!

Parabéns pelo trabalho e pela apresentação!
Seus resultados são muito interessantes!

Fiquei curiosa em relação a continuidade do trabalho. Vocês já pensaram nos ensaios que irão fazer para mostrar que o metabolismo lipídico pode estar relacionado à promoção do processo metastático? 

Vocês já fizeram essa mesma avaliação com outras linhagens metastáticas e não-metastáticas? Os resultados são semelhentes?

Você acredita que, de um modo geral, todas as células tumorais "mais agressivas" teriam o aumento da liberação de calor ligado ao metabolismo lipídico?

Obrigada!

 

Qual o aminoácido que a enzima pp-GalNAc-T6 apresenta especificidade? Existe algum motivo (sequência) de reconhecimento do sítio de O-glicosilação?