Boa Tarde Alana

Parabéns pelo seu trabalho.

Em determinados protocolos de tratamento de CRC a radioterapia também é utilizada. Vocês pretendem avaliar a combinação da radioterapia com os inibidores?

Boa tarde

O composto não foi seletivo para células de carcinoma de boca, entretanto, apresentou efeito pronunciado em 1 das 3 linhagens de câncer colorretal. O composto não parece tecido- ou câncer-específico. Alguma ideia do alvo molecular e do mecanismo de ação deste composto?

Vão expandir a testagem em outras linhagens e tipos tumorais?

Olá Gustavo,

Vou colocar aqui a minha pergunta e dar uma volta nos outros posteres... enquanto isso, fique à vontade para ir respondendo.

Vamos lá...

Qual o critério utilizado por vcs para definir o polimorfismo que está sendo estudado? Quão frequentes são esses polimorfismos nesse tipo de câncer (Leucemia?). Os resultados obtidos para esses polimorfismos caracterizados por vcs podem ser extrapolado para os demais polimorfismos encontrados nesses mesmos genes?

Olá Thales! Está por aí?

Vou colar minha pergunta aqui embaixo para ir adiantando e dar uma rodada pelos outros posteres... se quiser ir postando a resposta, eu já volto.

Vamos lá…

Fiquei curioso com os resultados referentes a borda C terminal de BRCA1.

Achei interessante que a deleção da Y1863 tenha sido suficiente para impactar a capacidade transcricional de BRCA1 no sistema de Luciferase.

Na verdade, achei ainda mais interessante o fato de que a perda dos 5 resíduos subsequentes não tenham um impacto acumulativo, o que sugere que possam estar atuando em conjunto com Y1863.

Pergunta: Vcs pretendem gerar mutantes independentes desses resíduos para aa “inertes” (ex. alaninas)? Em outras palavras, substituir cada um deles isoladamente por uma alanina a partir do Y1863 até o I1858, mas mantendo os demais aas íntegros?

Isso daria uma medida se o fenótipo observado é decorrente, simplesmente, de uma questão espacial (de tamanho da borda C-terminal) e independentemente da composição ou se é algo mais “refinado” e que dependa das propriedades químicas dos aas que compõem essa borda.

Olá Karolyne,

Vou deixar minha pergunta aqui enquanto visito os outros posteres... fique à vontade para ir respondendo e daqui a pouco eu retorno.

Vamos lá...

Vc encerra a sua apresentação falando sobre a clonagem dos genes IKZF2 e 5, mas nnao explica a razão pela qual está fazendo isso. Tem a ver com alguma abordagem para validar o modelo de regulação de CRLF2 por esses fatores transcricionais?

Você poderia explicar mais detalhadamente a razão pela qual está clonando esses genes?

Boa tarde Guilherme.

Parabéns pelo seu trabalho. Eu gostaria de te fazer algumas perguntas.

-Como você calcula o SI?

-Que outros experimentos pretendem fazer?

-Já pensaram avaliar outros tipos de linhagens de coloretal?

Houve avaliação da toxicidade do DMSO para as células?

Oi Ana Luiza,

Minhas congratulacoes pelo teu estudo. Tenho varias perguntas:

1. Por que usou DMSO? Seria devido ao mesmo solvente do inibidor (TSA)?
2. Não ficou claro no resumo se tu isolaste os exossomos ou mesmo as microvesículas, antes de purificar o sobrenadante em tubos AMCON. Apenas no video foi dada a explicacao do procedimento. Aliás qual foi o cutoff da membrana de AMCON usada?
3. Qual foi a viabilidade celular tanto no ensaio com DMSO e com TSA?
4. Qual a toxicidade do DMSO para as células?

Não está claro a razão de não ter executado algum experimento para a visualização de exossomos e microvesículas por microscopia, por exemplo confocal. Ou mesmo usar anticorpo contra CD63. Ou um marcador negativo de vesículas (talvez calnexina). A sociedade Internacional de vesículas extracelular publicou alguns parâmetros que possam ajudar na detecção de EV (Lötvall J, Hill AF, Hochberg F, Buzás EI, Di Vizio D, Gardiner C, et al. Minimal experimental requirements for definition of extracellular vesicles and their functions: a position statement from the International Society for Extracellular Vesicles. J Extracell Vesicles (2014) 3(1):1–6.)

Olá, Rayane!

Parabéns pelo trabalho e pela apresentação!

É bastante interessante que a oubaína não tenha efeito após o início do desenvolvimento do tumor! Vocês tem alguma hipótese para isso?

Vocês testaram o "tramento pós"  em algum outro período? Por exemplo, por volta do 15º dia? Ou testaram um tempo maior de tratamento com oubaína? Acredita que alguma dessas mudanças poderia interferir nos resultados?

No seu resultado 3, a oubaína aumenta o número de células B no baço dos animais sem melanoma (em relação ao animais sem melanoma não tratados). Nos seus resultados 7/8, a oubaína não aumenta as células B no grupo oubaína sem melanoma. Vocês tem alguma explicação para estes resultados discrepantes?

Obrigada!




 

Boa tarde, Amanda! Parabéns pelo trabalho e por sua apresentação! Gostaria de saber para que outros modelos experimentais vocês pretendem avançar com a investigação da atividade antitumoral da substância C6. Obrigada! Abraços.

Olá Thales! Parabéns pelo seu trabalho e apresentação.

Gostaria de saber qual ou quais outros ensaios funcionais de validação você considera que poderiam ser realizados para refinar ainda mais a classificação das variantes identificadas em BRCA1?

Gabriella, parabéns pelo trabalho! Além de abordar um tema muito promissor na oncologia eu gostei muito da sua apresentação, foi bem clara e objetiva!

Gostaria de fazer algumas perguntas:

1 – Você utilizou duas linhagens de GBM no seu trabalho e identificou diferenças na quantidade de células marcadas e na viabilidade celular após a exposição ao ZIKV. Na sua opinião, por que encontrou diferença entre as linhagens? Essas linhagens são representativas de tumores de baixo ou alto grau, possuem alguma mutação específica que possa ser associada a essa diferença observada, possuem mais marcadores de CSC, presença de receptores que permitem a entrada do vírus, etc?

2 – Qual linhagem endotelial utilizou no seu trabalho?

3 – Você pretende caracterizar o meio condicionado?

4 – Quais são os próximos passos que você irá desenvolver para caracterizar melhor o papel oncolítico do ZIKV?

5 – Pretende avaliar a associação dos tratamentos convencionais para GBM e ZIKV nos seus modelos experimentais?

6 – Existe alguma limitação para o uso terapêutico do ZIKV nos tumores cerebrais? Na sua opinião, utilizar um vírus que pode ser transmitido com facilidade poderia constituir uma limitação para a implementação dessa estratégia terapêutica?

7 – Existe algum relato na literatura de pacientes com GBM que foram infectados por ZIKV e tiveram algum benefício clínico?

Boa tarde, Lucas. Parabéns pelo trabalho. Vocês possuem bastante resultados e demonstraram que a apoptose parece ser a via de morte induzida pelo extrato. Vocês pretendem caracterizar melhor a apoptose, estudar vias de sinalização relacionadas ao mecanismo de ação do composto? Além disso, existem outros estudos in vivo sobre o efeito antitumoral do extrato, vocês pretendem avaliar o efeito antitumoral além do efeito tóxico desse extrato in vivo? Existem estudos em outros modelos tumorais?

Obrigada e parabéns pelo resultados promissores com o composto!

Olá, Mariana!

Parabéns pela excelente apresentação!!
Gostaria de saber como é feita a identificação da planta no momento da colheita (para evitar colher outra espécie, já que algumas plantas podem ser bastante parecidas). Em termos de mecanismo, como o hidrogel poderia estar causando todos esses efeitos e como consegue ser seletivo para a linhagem de câncer, sem efeito na célula não tumoral?

Mais uma vez, parabéns!!

Abraços

Olá, Alana!

Parabéns pela excelente apresentação!!
Gostaria de saber quais são as suas perspectivas em termos de avaliar os efeitos dos inibidores de CDK4/6 in vivo no câncer colorretal e também se há muitos efeitos colaterais, já que eles já estão sendo usados em CA  de mama.

Mais uma vez, parabéns!!

Abraços

Olá, Rayane!

Parabéns pela excelente apresentação!!
Gostaria de saber qual é a importância desse efeito imunomodulador da ouabaína no contexto do melanoma e também a que você atribui a diferença de resposta de sobrevivência no pré e no pós-tratamento.

Mais uma vez, parabéns!!

Abraços

Mateus,

Gostei da sua apresentação, foi bem clara. Parabéns.

Você realizou uma revisão integrativa acerca dos efeitos da Hipóxia no fenótipo de CSC no câncer colorretal. E gostaria de fazer algumas perguntas:

1 – Pretende realizar alguma etapa experimental durante o Mestrado?

2 – Quais marcadores de CSC foram utilizados nos estudos para caracterizar essa subpopulação específica (ex.: CD133, AXL, ...)? E quais foram as principais técnicas realizadas para essa identificação (Citometria, IHC, PCR ...)

3 – Em relação às intervenções terapêuticas levantadas na sua revisão, qual composto, droga ou fármaco, na sua opinião, tem maior chance de ser utilizado no tratamento do CRC? Existem estudos clínicos em andamento?

4 – Quais foram as principais abordagens realizadas nos estudos incluídos na revisão para avaliar a hipóxia? E quais os principais marcadores utilizados (detecção direta de HIF, expressão de genes regulados por hipóxia, ...)? E como a hipóxia foi induzida na maioria dos estudos (Modelos 3D, indução química, câmaras de hipóxia, hipóxia induzida por restrição de perfusão, ...)?

4 – Dentre os estudos incluídos na revisão quantos utilizaram modelos in vitro? Algum estudo utilizou modelos animais e/ou avaliou a relação entre hipóxia e CSC em amostras de tumores CRC?

Boa tarde Mariana, parabéns pelo seu trabalho.

Gostaria de tirar algumas dúvidas.

Pretende avaliar a formação de esferoides com o tratamento de Prima-1 nas linhagens G2 ou PLC? tal vez seria interessante incluir uma das linhagens como um controle.

Que outros ensaios pretendem fazer?

Olá, Amanda!

Parabéns pela excelente apresentação!!
Gostaria de saber como foi feita a síntese do híbrido e o motivo pelo qual essas moléculas foram escolhidas para a síntese. Você pretende fazer algum experimento para confirmar se a interação com as topoisomerases e a PKM realmente ocorrem?

Mais uma vez, parabéns!!

Abraços

Marianna, parabéns pelo trabalho! A apresentação foi clara e objetiva!

Gostaria de fazer algumas perguntas:

1 – Você mencionou no seu relato de caso que o paciente foi classificado pertencente ao subgrupo IKZF1plus, que apresenta um prognóstico bastante negativo. Qual a média esperada de sobrevida para os pacientes categorizados nesse subgrupo?

2 - O paciente em questão foi a óbito em menos de 1 ano após o diagnóstico. Na sua opinião, os SNPs identificados em vias importantes do sistema de reparo de DNA (BER, NER e HRR) contribuíram para esse desfecho? Outros pacientes incluídos no estudo também apresentaram SNPs nessas vias? E existem trabalhos na literatura que corroboram com esse achado?

3 – Você citou na apresentação que alguns estudos ainda estão em desenvolvimento para tentar explicar a ocorrência de alterações somáticas da LLA infantil. Quais estudos adicionais vocês pretendem realizar?

Olá Jade, parabéns pelo seu trabalho!

Você explica na sua apresentação os filtros que foram aplicados na seleção dos genes alvo. Gostaria de saber como foi determinado o valor de 6% para o último filtro aplicado?

Olá Daniel, parabéns pelo seu trabalho!

Gostaria de te fazer duas perguntas. Qual a frequência de mutações em PALB2 em pacientes com câncer de mama? Existem pacientes que apresentam mutações tanto em BRCA2 como em PALB2, ou estas mutações são excludentes?

Boa tarde, Daniel. Parabéns pelo seu trabalho. 

Gostaria de te fazer algumas perguntas. 1- Há quanto tempo você participa deste trabalho? E qual o seu envolvimento nos experimentos apresentados? 

Boa tarde Guilherme.

Parabéns pelo seu trabalho. Eu gostaria de te fazer algumas perguntas.

-Como você calcula o SI?

-Que outros experimentos pretendem fazer?

-Já pensaram avaliar outros tipos de linhagens de coloretal?

Boa tarde Alexander,

Parabéns pelo trabalho. Queria lhe perguntar que parametros você utilizou para avaliar as correlacoes obtidas dos dados do TCGA e sua relevancia no contexto biológico.

Existem outras citocinas classicamente associadas as respostas a liberação de NETs além da IL1b?

Qual o n dos experimentos de para análise de CCL2 e CCL5? Fiquei curiosa, pois os seus dados são bem interessantes e sugerem uma forte tendência de aumento.

Olá Mariana, parabéns pelo seu trabalho.

Após o tratamento com ASA, você esperaria que houvesse também uma redução da viabilidade celular? Se sim, o que poderia explicar os resultados que vocês obtiveram neste experimento?

Primeiramente, parabéns pelo trabalho!

Os resultados aqui mostrados evidenciam que tanto CeO2-x quanto FexCe1-xO2-β apresentam significativa atividade citotóxica e promovem expressiva redução da capacidade clonogênica das células MDA-MB-231, sabidamente resistentes a diversos tratamentos. Notei que para a avaliar a citotoxidade dessas nanopartículas em células normais estão previstos experimentos com linfócitos normais. Contudo, para descartar a possibilidade de um efeito “linhagem específico”, vocês já avaliaram os efeitos dessas nanopartículas CeO2-x e FexCe1-xO2-β em outras linhagens tumorais de mama ou em linhagens derivadas de outros tumores?

Além disso, vocês já avaliaram os efeitos dessas nanopartículas em células normais de mama (cultura primária) ou mesmo na linhagem "normal" de mama, MCF10?

Primeiramente, parabéns pelo trabalho!

Além disso, parabéns ao grupo por conduzir tão bem o estudo a cerca do papel das OPNs, não apenas com relação aos tumores de ovário mas também nos tumores prostáticos.

É notável que a alta expressão da OPNc está associada com eventos relacionados à progressão tumoral, envolvendo a via de PI3-K. Considerando todos os dados que o grupo já produziu, vocês acreditam que a OPNc pode ser utilizada como um biomarcador para o diagnóstico/prognóstico do câncer de ovário e também como um marcador indicativo de progressão?

Qual o aminoácido que a enzima pp-GalNAc-T6 apresenta especificidade? Existe algum motivo (sequência) de reconhecimento do sítio de O-glicosilação? 

Boa tarde, parabéns pelo seu trabalho.

Gostaria de tirar algumas dúvidas.

Pretendem fazer essa avaliação em outras linhagens celulares de cancer de mama?

Que outros ensaios pretendem fazer? estão pensando em avaliar cultura 3d?

Por que a escolha de avaliar as nanoparticulas em linfocitos? pretendem usar todas as subpopulações ou seria em subpopulações específicas.

Um belíssimo trabalho, parabéns à Carolinne e ao grupo!

Li o seu resumo e assisti ao seu vídeo, o desenho do trabalho e os resultados mostrados são muito interessantes! Fiquei curiosa em saber como foi feito o tratamento das vesículas com anexina 5, você poderia me explicar melhor ou me indicar uma referência com maiores detalhes desse tratamento? Como vocês interpretam o papel desse tratamento?

Quais serão as próximas etapas deste trabalho?

Boa tarde Andressa,

Meus parabéns pela apresentação e pelo trabalho. Seus resultados são muito interessantes.

Fiquei com uma curiosidade quanto a estabilidade das interações entre as proteínas da via MAPK e o Eucalyptol. Esses valores entre -5,1 e -6,8 são considerados altos e bons preditores de interação?

Aparentemente existe uma afinidade maior para ERK2 e CDK4. Você saberia me dizer se já tem algum estudo que tenha usado o eucalyptol e avaliado por Western Blot a ativação de ERK2 ou comparado o eucaliptol com inibidores de CDK4/6?

Oi Marianna,

Gostaria que me explicasse melhor a sentença: "...Furthermore, the cellular responses to damage, as those caused by chemotherapy, depend on DNA repair mechanisms that can counteract those damages, allowing cancer cells to thrive..."

Ao ler a sentença, dá-me a impressão de que o tratamento quimioterápico "nunca" surte efeito na recuperação do paciente, pois parece-me que "todas as células" conseguem se recuperar e neutralizar o dano causado pela quimioterapia. Haveria uma forma melhor de reescrever a sentença?

1 - quais seriam os mecanismos de ação dos genes selecionados e identificados?

2 - quais serão os próximos passos de modo a comprovar a hipótese?

Oi Natália parabéns pelo trabalho bastante interessante, gostaria de saber o porque você trabalhou com a concentração de 10-5 M? A concentração de 10-9M você explicou então fiquei curiosa de saber de onde surgiu a outra concentração de trabalho?

Outra curiosidade se você vai fazer os ensaios de migração e invasão celular? E também se pretende estudar o metabolismo do BPA e BPS nestas células para ver se existe diferença entre os metabólitos formados?

Thayana, primeiramente, parabéns pelo trabalho!

RNAs intergênicos são realmente intrigantes e podem desempenhar importantes papéis na regulação gênica e em doenças. Contudo, tanto na parte da biologia molecular quanto computacional ainda faltam métodos para sua predição... Embora já saibamos que muitos transcritos são associados a lncRNAs, ainda não se sabe muito a respeito dos papéis exercidos pelos lncRNAs, certo? Nesse trabalho vocês já identificaram 6.200 RNAs intergênicos (293 up e 70 down) em pacientes CRLF2-high em relação aos pacientes CRLF2-low. Vocês chegaram a avaliar as vias ou processos nos quais os RNAs up ou RNAs down estão envolvidos, exclusivamente?

Boa tarde, Alexander. Parabéns pelo seu trabalho!

Gostaria de te fazer algumas perguntas...

1- Há quanto tempo você desenvolve este trabalho?

Vocês compararam, no mesmo experimento, a preparação aquosa e a alcoólica do extrato? Quais seriam as vantagens da alteração da via de administração proposta para este fármaco? 

Olá, Carolina!

Parabéns pelo trabalho!!

Quais foram as alterações morfológicas que vocês observaram nas HBMEC cultivadas com meio condicionado da T98G?

As HBMEC foram cultivadas em sistema 2D, certo? Vocês já pensaram em fazer este mesmo ensaio com HBMEC cultivadas em um sistemas 3D, como o Matrigel? Já viu trabalhos com este tipo de modelo?

Estas linhagens de glioblastomas são similares em termos de  "agressividade"? Alguma hipótese sobre o motivo do meio condionado de cada uma delas desencadear respostas diferentes nos parâmetros que vocês avaliaram?

Obrigada!

Olá Gabriela parabéns pelo trabalho, fiquei com uma dúvida a respeito do percentual de infecção do ZV sobre as células U87MG e GBM02. Foram iguais? A que você associa a diferença encontrada sobre a viabilidade das duas linhagens de GBM?

Recentemente o ZV ficou muito famoso por causar microencefalia em recém nascidos, saberia me dizer se os efeitos causados pelo ZV que vocês identificaram sobre as células endoteliais e a mudança de fenótipo das microglias poderiam também acontecer durante o desenvolvimento encefálico destes bebês?

Boa Tarde Mateus,

Parabéns pela apresentação. Gostei bastante do seu estudo.

Gostaria que você comentasse acerca das intervenções terapeuticas (terapias-alvo).

Como vatalanib reduz a atividade das proteínas ABC? Quais foram as proteínas avaliadas? Quais quimioterápicos tradicionais foram utilizados?

Qual a previsão da publicação da sua revisão?

Parabéns a todos do grupo e em especial a Natalia  pela apresentação. O trabalho é muito interessante por estudar o efeito de um composto de larga utilização na clínica, mas com mecanismos de ação ainda não totalmente esclarecidos.

1 - A escolha das linhagens para cobrir as possibilidades de mutação em p53 é elogiável. Porém, mesmo recorrendo ao resumo, não ficou muito clara a importância da mutação R280K. Ela tem relevância epidemiológica (p.ex. para o câncer de mama), ou é um modelo de estudo? Está associada com perda ou ganho de função?

2 - Logo nos primeiros resultados, vocês destacaram um possível efeito na indução de um estado oligomérico da p53. A existência desses oligômeros poderia ser considerada um fator de risco para o câncer de mama (ou algum outro), ou então um indicador de um estado pré-maligno? Existem estudos em pacientes que fazem uso regular de heparina, como aqueles com problemas de coagulação?

3 - Qual foi a racional para a escolha das concentrações de heparina utilizadas nas culturas de células? Elas apresentam algum paralelo com o que se vê na clínica, de forma que seria possível se chegar a uma concentração profilática de heparina?

4 - Pude observar uma certa discrepância entre os resultados de MTT e LDH, bem como de uma (possível) sensibilidade um pouco maior da linhagem H1299. Poderia comentar um pouco mais sobre isso aqui?

5 - Uma curiosidade mais distante, mas existem doenças lisossomais que levam a acúmulo de GAGs, glicolipídios, carboidratos, etc. Sabe-se pouco sobre essas doenças, mas vocês já observaram algum estudo que relacionasse essas doenças com o estado da p53 nesses pacientes?

Muito obrigado e parabéns pelo trabalho!

Oi Gabriella vc está online? Viu minhas perguntas?

Boa tarde, Carolinne! Parabéns pelo seu trabalho. Gostaria de te fazer algumas perguntas...

1- No caso da linhagem MCF10 praticamente não se observa expressão de sistenina 1 e CD63. Você acredita que as MCF10-EVs foram de fato purificadas?