Parabéns Isabella e grupo pelo estudo. Isabella, como será feito o estudo de expressão das isoformas? Quem serão os controles de avaliação do seu estudo? 

Bom dia, Giulia. Primeiramente, parabéns pelo seu trabalho. Gostei do vídeo.

Farei algumas perguntas que farão parte do processo de avaliação, mas acredito que elas também contribuirão para a futura publicação. Gostaria de começar com um comentário:

Na afirmação “(...) 8 participants reported not having undergone any changes in treatment or medical care”, eu recomendaria não apenas apresentar o dado absoluto (N=8), mas também o relativo em percentil, pois facilita a comparação com outros estudos. Eu utilizei este exemplo, mas isso acontece em todo o corpo do resumo, pois os dados relativos foram apenas mostrado na apresentação.

Perguntas e comentários:

1) Houve aleatorizacao no recrutamento dos pacientes? Quais foram os critérios de inclusão e exclusão no recrutamento?

2) Em relação aos dados mostrados sobre o número de pacientes infectados, cancelamento de consultas e/ou cirurgias, e demais avaliações, quais observações podem ser feitas quando estes resultados são comparados aos estudos realizados em outros países?

Parabéns pelo trabalho, Cassiana!

Vocês têm alguma hipótese para justificar o melhor efeito do bioativo sobre a células de câncer de pele melanoma, em relação a não-melanoma? Vocês esperavam esse resultado?

Giulia, parabéns pelo seu projeto e apresentação. Atualmente precisamos ter o maior número possível de estudos visando avaliar o impacto da pandemia de COVID19 nas diferentes esferas da sociedade, ressaltando o problema que essa pandemia pode causar no tratamento do paciente oncológico.

Desta forma, gostaria de fazer algumas perguntas sobre seus dados.

Primeiramente, de que forma que os pacientes são localizados, selecionados e incluídos no projeto? No início da sua apresentação você informa que há contato via e-mail e rede social. Mas qual base de dados é utilizada para localizar os pacientes?

Seu dado de 80% dos pacientes ter relatado algum efeito sobre a saúde mental é muito relevante. Há a possibilidade de comparar esse dado com uma base de dados de pessoas sem câncer? Isso é, ver se o paciente oncológico, com todo o estresse que essa doença causa, está mais propício a ter problemas psicológicos associados a pandemia?

No final da sua apresentação você informa que “houve um impacto significativo no dia-a-dia dos pacientes”. Essa conclusão pode ser afirmada com base nos seus resultados?

No aguardo do seu retorno.

Pedro

Parabéns pelo trabalho. Queria saber se outros tipos de heparina com maior potencial anticoagulante que o LABH foram testadas como anti metastáticas.

Olá Cassiane, tudo bem?

Parabéns pelo trabalho e apresentação!

Gostaria de saber se o composto bioativo isolado da alga vermelha está com pedido de patente?

Em relação à alga vermelha, qual a espécie estudada? Qual foi o local de coleta? Há espécimes depositados em algum herbário?

Qual foi a sua participação efetiva na obtenção dos resultados?

Att

Christian Ferreira

Olá Marcos. Parabéns pelo trabalho e o seu grupo na investigação. Como foi feita a seleção deste marcador? O grupo já tinha estudos anteriores que indicavam ele como um possível alvo? Foi uma busca literária? 

Bom dia, Juliana. Primeiramente, parabéns pelo seu trabalho. Gostei bastante do vídeo.

Farei algumas perguntas que farão parte do processo de avaliação, mas acredito que elas também contribuirão para a futura publicação:

1) No resumo é mencionado que “A list of four target proteins (patent pending) was proposed from this inference for 111 breast tumor patients that included the different molecular subtypes (…). Mas não ficou claro para o que esta lista se propõe.

Também é mencionado que “The overexpression of these four proteins was validated remaining high in all molecular subtypes.” Novamente, não ficou claro para o que a expressão dessas proteínas se propõem.

Seriam marcadores de pior prognostico? Foi realizada uma curva de sobrevida global ou livre de doença para suportar a relevância desses alvos no desfecho clínico das pacientes?

2) Pelo que entendi através dos resultados, essas proteínas são expressas em alto niveis em amostras ou células de câncer de mama quando comparadas ao tecido nao tumoral. No entanto, gostaria de saber qual se a expressão delas é exclusiva a neoplasias de mama ou se também ocorre em outras patologias da mama como Fibroadenoma, Displasia mamária, etc.

3) Na figura mostrada na apresentação com o titulo “Gene expression profile of the selected targets in tumor and non-tumor tissues”, eh apresentado que o gente B possui uma  mediana de expressão em tumores de cabeça e pescoço superior as amostras de câncer de mama; e que o gene D uma mediana de expressão em tumores de colón e rins também superior as amostras de câncer de mama.

Será que estes dois seriam marcadores de carcinomas em geral e não exclusivos ao câncer de mama?

4) Nas últimas linhas do resumo, eh mencionado que “To understand which intracellular pathways could be involved with these proteins, analysis from the human interactome data was performed. We observed that the proteins downstream the intracellular signaling pathway present important roles in many processes of tumor progression.”

Qual foi a ferramenta utilizada para as análises de interactoma? Quais foram os processos celulares e vias de sinalização encontrados? Qual foi o p-value ou z-score ou false discovery rate usado como corte para essas analises?

5) A última frase do resumo afirma  “we expect that these proteins could be considered as suitable targets for therapy with a lower rate of undesirable side effects and greater therapeutic efficacy.”

Apesar dessa afirmacao, as pesquisas e o tratamento do câncer de mama se concentram atualmente no tratamento personalizado, considerando a história das pacientes e cada subtipo como uma doença diferente. Dessa forma, considerar algo que é comum a todos os subtipos não seria caminhar contra o tratamento personalizado?

Leonel, first of all, congratulations for your results and video. The project is exciting and has a high potential for translational research. Based on your fibronectin and laminin expression results, some questions arose.

TP53-/- astrocytes express the same levels of fibronectin and laminin in the ECM as TP53+/- astrocytes. Thus, the role of TP53 in this context is related to the mutational gain of function or loss of their tumor suppressor function due to lack of p53 expression?

Furthermore, are fibronectin and laminin genes (or gene families) TP53 targets? Has the regulation of these genes by TP53 already been presented in other studies?

What additional experiment do you suggest to confirm your hypothesis regarding the loss of p53 impacting the fibronectin and laminin expression in the astrocytes ECM?

Regards

Pedro

Boa tarde Igor, meus parabéns pelo belo trabalho! Tenho algumas dúvidas: Como é feita a superexpressão do miR34a e a inibição do miR125b? É ao mesmo tempo? Por quais técnicas?

No resultado do blot (Apoptotic protein expression in miR34a overexpression and miR125b inhibition in wt p53 cell line (A172)), falta a confirmação da superexpressão e da inibição dos miRNAs. Como vocês confirmaram a superexpressão e da inibição desses miRNAs?

Você acredita que a resposta ao dano do DNA nas células p53 wt ocorre mais rapidamente do que nas células com p53 mutado devido a que?

O que mais vocês pretendem fazer de experimentos para elucidar os papéis dos miR34a e miR125b nas células mutadas para p53?

Dear author,

The work seems to be very interesting. Could you please share your video presentation?

All the best

Fábio

Olá Fernanda, parabéns pelo trabalho e grupo pela investigação. Como vocês pretendem investigar (técnica) a metilação das 4 ilhas CpG?

Excelente trabalho!

Queria saber como as figuras postadas pelos particpantes da pequisa foram interpretadas pelos pesquisadores na valiação da causa do cancer.

Prezada Julia,

Parabéns pela sua excelente aprestação.

Gostaria que você comentasse a respeito dos seguintes pontos:

1. Os bancos usados para prospecção das proteínas de membrana foram de dados transcriptômicos, sabendo que pode haver uma diferença entre transcrição e tradução, você acha que seria importante pesquisar bancos com dados proteômicos?

2. Você saberia dizer se as proteínas de membrana selecionadas são glicosiladas?

3. Para uso como biomarcador, a combinação das proteínas poderiam trazer uma melhor seletividade e especificidade na ROC?

Obrigado e parabéns.

Fábio

Parabéns Isabelle e grupo pelo trabalho. Vocês pretendem investigar estes receptores em outras linhagens celulares de glioblastoma?

Primeiramente Juliana, parabéns pelo seu trabalho! O papel dos NETs na modulação da apoptose de tumores de mama já foi anteriormente descrito por outros grupos? E em relação a outros tumores, esse papel já foi caracterizado?

Boa tarde! Gostaria de saber se os efeitos antitumorais da heparina não relacionados ao efeito anticoagulante já foram caracterizados. Você sabe dizer como a heparina de baixo potencial anticoagulante poderia estar atuando?

Michelle, parabéns pelo seu trabalho! Como vocês fizeram a medida do wound healing? Foram realizadas fotos das culturas em diferentes tempos e a quantificação foi feita através de algum programa computacional? Você já pensou em medir a proliferação dessas células para descartar a possibilidade do fenômeno observado nesse ensaio ser devido à redução proliferação? Uma sugestão também seria realizar o ensaio usando uma membrana de transwell para a confirmação da redução da migração celular. 

Parabéns pelo trabalho. Os resultados são bastante interessantes e promissores. Gostaria de saber se vocês já sabem o mecanismo de ação da LABH? 

Olá Rafaela, tudo bem?

Parabéns pelo trabalho e apresentação!

Segundo seus resultados a alantoína reduz a atividade da cisplatina. Gostaria de saber se você tem informações sobre interações entre esses compostos?

Qual foi a sua participação efetiva na obtenção dos resultados?

Att

Christian Ferreira

Parabéns pelo trabalho. Os resultados são bastante promissores. Gostaria de saber se o miR-210 influencia a angiogênese e a ativação do processo de transição epitelial-mesenquimal, que em tumores epiteliais malignos, o potencial metastático tem sido relacionado a este evento.

Olá,

Faltou vc explicar melhor o que são os sais mesoiônicos e quais as diferenças entre os 4 compostos que vc estudou. Qual a hipótese para 2 deles terem apresentado bom efeito citotóxico e outros 2 não? Em relação a citotoxicidade contra células normais, foi feito esse controle?

Prezada Anna,

Excelente e clara apresentação. Parabéns.

Você poderia explicar os pontos abaixo:

1. Tentaram validar a interação da PAB2 com ROCK2, usando ROCK2 como "bait" ou por outra técnica?

2. Qual a justificativa da expressão de PALB2 aumentar e depois diminuir ao longo da IR? Assim como com o aumento da concentração de olaparibe? O que explica este comportamento?

Obrigado e parabéns novamente.

Fábio

Olá Mariana, parabéns pelo trabalho e pela apresentação! Fiquei me perguntando como vcs classificaram as revistas de Translational Medicine. Apenas pelo título da revista? Será que as outras revistas também não apresentam artigos da área Translational?

Outra questão é quantos artigos de cada revista foram analisados?

Olá Grazielle, tudo bem?

Parabéns pelo trabalho e apresentação!

No resumo só aparece o seu nome como autora, o nome da Gisele e da Janaína não estão aparecendo. Verifique depois com os organizadores, pois se for algum erro da plataforma, pode não aparecer os nomes delas no certificado.

Segundo seus resultados a metformina e a rotenona revertem os efeitos da alantoína na diminuição da atividade da cisplatina, e esse efeito é sinérgico em ambos os casos. Você já cogitou a possibilidade de representar os dados utilizando o isobolograma?

Att

Christian Ferreira

Excelente trabalho jade. As alterações observadas de ganho ou perda de função alteraram a expressão gênica, correto? E a expressão proteica, vocês chegaram a avaliar de alguma forma? Penso que no caso das mutações, por exemplo, elas poderiam ser sinônimas e não alterarem a expressão proteica. 

Parabéns Grazielle. Seu projeto é bastante empolgante, e os resultados muito promissores. Eu li seu resumo e assisti o seu vídeo. Surgiram algumas dúvidas em relação a esse fenômeno (TLS).

- Quais os sinais e/ou sintomas estão associados a este evento (TLS)?

- Já existem trabalhos publicados mostrando que esse fenômeno interfere na resposta imune contra o tumor?

Olá Mariana,

Vou deixar minha pergunta aqui enquanto circulo pelos outros posteres... nesse meio tempo fique à vontade para ir respondendo.

Vamos lá...

Mariana… Sobre o mecanismo de regulação envolvendo ABCB1 e COX2.

Tirando o ensaio de docking computacional de vcs, existe algum outro dado na literatura que suporte a inibição de ABCB1 por AS?

Existe algum outro inibidor conhecido deABCB1 que pudesse ser utilizado para testar se seria capaz de mimetizar os resultados observados com AS?

Fiquei pensando se seria possível que o que vcs estejam vendo seja um mecanismo compensatório sim, mas decorrente da inibição de COX2 e não necessariamente de ABCB1. Faria sentido?

Olá Fernanda, parabéns pelo trabalho! Gostaria de saber melhor a função do GATA6 no pâncreas. Nos outros tumores também se aplica a relação inversa da expressão de GATA6 com o prognóstico?

Lucas e equipe. Parabéns pelo trabalho. Resultados bem interessantes. Vocês pretendem avaliar os efeitos desta fração na composição celular do microambiente? seria bem interessante ver os efeitos. Também poderiam fazer um ensaio de proteomica para ver os efeitos. Novamente parabéns. !

Parabéns pelo trabalho. O estudo esta muito bem estruturado e os resultados são bastante promissores. Vocês estudaram a expressão de marcadores epiteliais e mesenquimais a nível de mRNA. A expressão de proteínas também é modulada em resposta ao 5-HT? Vocês já investigaram alguma coisa no contexto de resistência a drogas no seu modelo de estudo?

Parabéns pela apresentação!! Foi feita alguma caracterização dos receptores de 5-HT expressos nestas células? Também foi avaliada a atividade de SERT e os processos de serotonylation? Vocês pensaram em fazer comparação com algum fármaco agonista dos receptores 5-HT ou SSRI?

Obrigado!

Como os quatro transcritos foram identificados como superexpressos?

Boa tarde, João! Parabéns pelo trabalho! Ele me interessa muito, visto que trabalho com células-tronco e câncer colorretal. Gostaria de lhe fazer duas perguntas: 1) por acaso, vocês tem pretensão de estudar a interação dos tumores com os telócitos, conhecidos por estarem na lâmina própria estimulando o nicho de célula-tronco colônica?; 2) vocês pretendem fazer análises in vitro?

Obrigado desde já pela atenção!

Boa Tarde Isabel

Parabéns pelo seu trabalho.

Seria interessante vocês calcularem o índice de seletividade para saber se o composto está realmente atuando de forma mais específica nas células de melanoma, sem efeito nas células sadias. 

Quais serão os próximos experimentos para o seu estudo?

Olá, Natália!

Parabéns pelo trabalho, muito interessante!

Fiquei com algumas dúvidas em relação ao modelo com linhagens.

Você mostra em um slide mais inicial que a linhagem MDA-231 expressa a p53 mutante, a MCF-7 a p53 WT e a H1299 não expressa p53. Mas os resultados de MTT e LDH parecem bem semelhantes entre as linhagens. Vocês esperavam isso?

Como vocês pretendem avaliar se a indução da morte com o tratamento com heparina tem relação com a p53?

O que você acha que levou a diferenças tão grandes entre os ensaios de MTT e LDH?

Uma sugestão é vocês calcularem o IC50 desses ensaios! Fica melhor para comparar!

Obrigada!

1 - Quais os principais achados do trabalho que podem contribuir para o tratamento da leucemia mielóides?

2 - Quais serão os próximos passos para comprovação da hipótese? Não seria necessário trabalhar com inibibdores da HKII?

Boa tarde Jessica,

Primeiramente parabéns pelo trabalho. Vi que você está fazendo sua iniciação científica. Você participou de todo o processo desse trabalho? Vocês estão de parabéns pela abordagem e o conjunto de técnicas utilizados para responder a pergunta do projeto.

Eu queria lhe perguntar se já existem ensaios clínicos para terapias direcionadas a Hexoquinase II no tratamento de leucemia ou outros tipos tumorais.

Boa tarde Nicolas,

Parabéns pelo trabalho e abordagens utilizadas. A ITGA4 foi um hit recorrente nas analises de omicas realizadas por vocês. Qual o papel biológico que você imagina que essa alteração na integrina alfa4 exerceria nas celulas endoteliais ao interagir com as células circulantes?

Outra pergunta/sugestão seria se vocês planejam avaliar a permeabilidade dessas monocamadas de HUVEC após o tratamento com evoMDA?

Olá Thaíssa parabéns pelo trabalho, bastante interessante. Tenho curiosidade de saber se vocês fizeram a quantificação das substâncias que foram identificadas nas frações selecionadas e se a substância pyrenephorol comum as duas frações está presente nas mesmas concentrações?

Gostaria de saber se vocês pretendem testar a citotoxicidade e seletividade de todas as substâncias identificadas separadamente?

Primeiramente parabéns ao grupo pelo trabalho e pela apresentação de boas ideias.

Minha primeira questão é sobre a redução da viabilidade pelo tratamento com o PRIMA1. Como foi apresentado, a principal função de PRIMA1 neste trabalho é a restauração da atividade de P53. Com explicar a redução da viabilidade nas linhagens celulares que não expressam P53 ou possuem P53 não-mutada?

Também, como as mutações em P53 levam a um aumento do potencial oncogênico, seria interessante fazer uma marcação específica de células progenitoras tumorais nos esferoides para avaliar o potencial do PRIMA1 nestas células especificamente, já que se sabe que estas células contribuem para a resistência a agentes quimioterápicos.

Uma sugestão para o desenvolvimento do trabalho seria uma avaliação das possíveis mudanças morfológicas celulares que poderiam ocorrer com a redução dos agregados amiloides e também da redução de moléculas de adesão célula-célula, que poderiam estar ocorrendo após o tratamento com o PRIMA1, levando a uma menor formação dos esferoides.

Olá, Vitória!

Parabéns pelo trabalho e pela apresentação!
Seus resultados são muito interessantes!

Fiquei curiosa em relação a continuidade do trabalho. Vocês já pensaram nos ensaios que irão fazer para mostrar que o metabolismo lipídico pode estar relacionado à promoção do processo metastático? 

Vocês já fizeram essa mesma avaliação com outras linhagens metastáticas e não-metastáticas? Os resultados são semelhentes?

Você acredita que, de um modo geral, todas as células tumorais "mais agressivas" teriam o aumento da liberação de calor ligado ao metabolismo lipídico?

Obrigada!

 

Primeiramente gostaria de parabenizar o grupo pelo trabalho desenvolvido.

Gostaria também de levantar alguns questionamentos que não consegui compreender muito bem:

1. Foram utilizados ratos fêmeas da espécie wistar. O animal não foi citado, somente a espécie.

2. Como foi feita a preparação do açaí para ser administrado? Foi o extrato? Por que a salina foi utilizada como veículo?

3. Existe algum grupo de animais com a indução dos tumores de mama sem nenhum tipo de tratamento? Esse grupo seria importante para comparação do processo inflamatório desenvolvido no microambiente tumoral para comparar com os tratamentos utilizados. 

4. Não entendi com muita clareza a formação do tumor mesmo com o tratamento com os fármacos padrão e seu uso com salina. Esse tumor seria maior ou menor em tamanho ou invasividade que o tumor do grupo sem nenhum tratamento?

4. Seria interessante explorar mais esse microambiente inflamatório formado principalmente quanto às citocinas inflamatórias, já que o perfil celular é diferenciado com os tratamentos.

5. Também vale considerar a análise de espécies reativas de oxigênio, já que o açaí apresenta atividade antioxidante. Esta característica pode estar associada com a cardioproteção apresentada, levando em consideração o mecanismo de ação do regime FAC-D.

Parabéns ao grupo pelo trabalho e a Renata pela apresentação. Trabalhos buscando alvos para rastreamento de doenças silenciosas são de extrema importância e podem trazer grande impacto para a saúde pública. Algumas pequenas dúvidas:

1 - Existe alguma diferença entre na malignidade associada a doença causada por cada um dos subtipos que vocês investigaram? Progressão, recidiva, resposta a tratamento farmacológico? É possível a co-infecção por mais de um subtipo?

2 - HPV é um vírus considerado bastante prevalente na população, e muito se discute sobre a importância da vacinação. Existem dados sobre o efeito da vacinação contra o HPV para a prevenção da RRP?

3 - Vocês concluíram que o HPV só pôde ser detectado na saliva de pacientes com doença ativa, que já requereria intervenção cirúrgica. Isso não seria uma limitação, claro, considerando o atual estado do projeto? Qual seria um próximo passo visando aumentar a especificidade do ensaio? Existe algum outro marcador molecular que poderia ser co-expresso, ou liberado em resposta à uma infecção inicial?

Parabéns a todos pelo trabalho!