Parabéns a todos do grupo e em especial a Natalia  pela apresentação. O trabalho é muito interessante por estudar o efeito de um composto de larga utilização na clínica, mas com mecanismos de ação ainda não totalmente esclarecidos.

1 - A escolha das linhagens para cobrir as possibilidades de mutação em p53 é elogiável. Porém, mesmo recorrendo ao resumo, não ficou muito clara a importância da mutação R280K. Ela tem relevância epidemiológica (p.ex. para o câncer de mama), ou é um modelo de estudo? Está associada com perda ou ganho de função?

2 - Logo nos primeiros resultados, vocês destacaram um possível efeito na indução de um estado oligomérico da p53. A existência desses oligômeros poderia ser considerada um fator de risco para o câncer de mama (ou algum outro), ou então um indicador de um estado pré-maligno? Existem estudos em pacientes que fazem uso regular de heparina, como aqueles com problemas de coagulação?

3 - Qual foi a racional para a escolha das concentrações de heparina utilizadas nas culturas de células? Elas apresentam algum paralelo com o que se vê na clínica, de forma que seria possível se chegar a uma concentração profilática de heparina?

4 - Pude observar uma certa discrepância entre os resultados de MTT e LDH, bem como de uma (possível) sensibilidade um pouco maior da linhagem H1299. Poderia comentar um pouco mais sobre isso aqui?

5 - Uma curiosidade mais distante, mas existem doenças lisossomais que levam a acúmulo de GAGs, glicolipídios, carboidratos, etc. Sabe-se pouco sobre essas doenças, mas vocês já observaram algum estudo que relacionasse essas doenças com o estado da p53 nesses pacientes?

Muito obrigado e parabéns pelo trabalho!

Olá, Natália!

Parabéns pelo trabalho, muito interessante!

Fiquei com algumas dúvidas em relação ao modelo com linhagens.

Você mostra em um slide mais inicial que a linhagem MDA-231 expressa a p53 mutante, a MCF-7 a p53 WT e a H1299 não expressa p53. Mas os resultados de MTT e LDH parecem bem semelhantes entre as linhagens. Vocês esperavam isso?

Como vocês pretendem avaliar se a indução da morte com o tratamento com heparina tem relação com a p53?

O que você acha que levou a diferenças tão grandes entre os ensaios de MTT e LDH?

Uma sugestão é vocês calcularem o IC50 desses ensaios! Fica melhor para comparar!

Obrigada!