Prezada Ana Luiza, parabéns pelo trabalho em andamento e pela excelente apresentação dos resultados obtidos até então. Tenho algumas dúvidas e agradeço desde já pelas respostas.

- Como foi feita a comprovação/validação de inibição das iHDAC após tratamento?

- Das vias de sinalização identificadas como "exosome - pathway (Blood coagulation, CCKR, ...)" melhor poderia se relacionar com o mau prognótico do GBM? 

- As proteínas RABs identificadas já foram identificadas em exosomas de outros tumores? ou somente a expressão estava realcionada ao potencial oncogênico dos tumores em geral?

Parabéns e sucesso com o trabalho

Houve avaliação da toxicidade do DMSO para as células?

Oi Ana Luiza,

Minhas congratulacoes pelo teu estudo. Tenho varias perguntas:

1. Por que usou DMSO? Seria devido ao mesmo solvente do inibidor (TSA)?
2. Não ficou claro no resumo se tu isolaste os exossomos ou mesmo as microvesículas, antes de purificar o sobrenadante em tubos AMCON. Apenas no video foi dada a explicacao do procedimento. Aliás qual foi o cutoff da membrana de AMCON usada?
3. Qual foi a viabilidade celular tanto no ensaio com DMSO e com TSA?
4. Qual a toxicidade do DMSO para as células?

Não está claro a razão de não ter executado algum experimento para a visualização de exossomos e microvesículas por microscopia, por exemplo confocal. Ou mesmo usar anticorpo contra CD63. Ou um marcador negativo de vesículas (talvez calnexina). A sociedade Internacional de vesículas extracelular publicou alguns parâmetros que possam ajudar na detecção de EV (Lötvall J, Hill AF, Hochberg F, Buzás EI, Di Vizio D, Gardiner C, et al. Minimal experimental requirements for definition of extracellular vesicles and their functions: a position statement from the International Society for Extracellular Vesicles. J Extracell Vesicles (2014) 3(1):1–6.)