Proceedings of Oncobiology Symposiums
Proceedings of XIV Oncobiology Symposium

Olá, Luciana, 

Com base nos seus achados sobre o possível eixo de regulação da expressão de FOXK2 via ativação de AKT1 em modelos celulares de quimiorresistência, como você avalia o potencial desses alvos moleculares como possíveis estratégias de modulação farmacológica?

Tudo bem Thales? Acho que já falei isso algumas vezes mas mesmo assim repito, meus parabéns pelo trabalho que vocês desenvolveram. Os resultados são claros, consistentes e se encaixam muito bem em oferecer uma perspectiva das funções e interações de CDK9. 

O trabalho avaliou em sua maior parte células de adenocarcinoma de cólon HCT116, correto? Vocês acreditam que essa dinâmica funcional de CDK9 seja válida para a maioria dos tipos tumorais?

Algo que achei bastante interessante foi o aumento do número de células com mais do que 4 cópias do material genético de acordo com as análises de citometria após a irradiação. A knockout de CHK2, aparentemente, leva a um aumento ainda maior de células poliploides quando associado a irradiação. Você teria alguma hipótese para explicar esse evento de acordo com a funções exploradas pro vocês de CDK9 e CHK2?

Olá Luciana. Meus parabéns a você e a todos os envolvidos nesse trabalho! Queria tirar uma dúvida e conversar sobre as perspectivas do seu trabalho.

Minha dúvida é mais uma particularidade metodológica. Na figura 2c de seu poster há um IB das proteínas de interesse na fração citoplasmática e na fração nuclear. Existe marcação para a forma fosforilada de Akt em ambas as frações. No entanto a marcação para Akt total só é observável na fração citoplasmática. Se temos Akt fosforilada no núcleo não deveríamos ter também marcação para Akt total nessa fração?

Os resultados que vocês já obtiveram me parecem muito promissores e de fato acredito que uma co-imunoprecipitação de Akt e FOXK2 será muito importante para reforçar ainda mais essa via de regulação proposta. Em sua apresentação por vídeo, você destacou que FOXK2 pode também se comportar como um promotor tumoral em outros tipos de câncer. Você acredita que isso ocorreria por uma regulação diferencial das vias que vão levar (ou não) a fosforilação de FOXK2 ou seria algo mais relacionado com distintos alvos transcricionais de FOXK2 em si?

Boa tarde! Gostaria de saber se já foi observada alguma alteração de CDK9 em pacientes que apresentam mutações no gene BRCA1?

Como os autores conciliam o aumento da proliferação das células transfectadas com TOB2 e a redução da expressão de c-Myc, uma vez que c-Myc é um oncogene associado à transformação celular e proliferação?

Como os autores explicam a dissonância entre o ensaio de proliferação celular por cristal violeta e a contagem total de células?

Como os autores conciliam os dados de expressão basal de TOB2 da figura 1C com os das figuras 2B/C/D? Na figura 1C, células HEK293T apresentam a menor expressão proteica de TOB2 entre as linhagens do painel testado e já na figura 2D, estas mesmas células transfectadas com o vetor vazio apresentam uma banda de TOB2 considerável no WB.

Os autores têm alguma pista do mecanismo de regulação negativa entre TOB2 e c-Myc? Esse mecanismo pode estar relacionado com a deadenilação do mRNA de c-Myc por TOB2?

Como você avalia esta influência do tempo? Melhores resultado de parada do ciclo após 72h, mas esta parada não ocorre de forma mais rápida (figura 4)?

Olá Julia, 

Belo trabalho! Gostaria de saber se existe alguma outra forma de induzir os macrófagos para o tipo TAM além da adição de meio condicionado. Isso funcionaria com qualquer meio condicionado ou a linhagem MV3 tem alguma característica específica?

Obrigada, 

Araci

Olá Júlia, ótima apresentação.

fiquei curiosa do porque você escolheu olhar especificamente estas vias e se os teus achando estão de acordo com o esperado, especialmente em relação a mapk e akt.

voces chegaram a faZer os experimentos (ou planejam) com outras células tumorais? De outros tipos tumorais? Ou você acha que isso não alteraria seu resultado? 

também gostaria de saber mais sobre quais os proximos passos. Em especial, vocês planejam algum outro ensaio funcional e qual seria. 

Obrigada! 

Olá Luiz.

Projeto interessante!

Você pensou em testar essas drogas usando um modelo 3D, por exemplo de esferoide? Ou co-cultura?

Última pergunta, o que seria exatamente esse B/R que você colocou depois dos nomes das linhagens?

Abraços, 

Araci

Boa tarde Luiz Fernando,

Parabéns pelos seus resultados. São muito bonitos e empolgantes. Eu vi seu pôster, e fiquei com uma dúvida. Qual o efeito das chalconas em células não tumorais (sadias)? Os fármacos apresentam efeito seletivo?

Boa tarde Julia,

Parabéns pelos seus resultados. São muito bonitos e empolgantes. Eu assisti a sua apresentação, e fiquei com uma dúvida. Embora os efeitos imunomodulatórios da lipoxina (LX) sobre macrófagos sejam muito claros, eu gostaria de saber qual o impacto da LX em outros tipos celulares. Já existem resultados sobre isso? 

Olá Thaís,

Excelente apresentação!

Achei que você foi um pouco discreta no título, já que você viu outras características além de proliferação, como formação de colônia (sobrevivência?), regulação entre Myc e Tob2...

Você está pensando em outra alternativa para reduzir ou deletar Tob2 para conseguir ver efeitos maiores nos experimentos da figura 6?

Abraços e boa sorte!

Araci

Como os autores explicam a dualidade de TOB2 em termos proliferativos?

Olá! Parabéns pelo trabalho!

Gostaria de saber se esse composto já foi testado nessas linhagens? Já foi avaliado frente a células não tumorais? Além disso, pretende avaliar em modelo animal? Seria a continuação do seu trabalho? Se não, o que pretende fazer a partir de agora?

Obrigada!

Olá Larissa,

Boa Tarde! Parabéns pelo seu trabalho. 

Tenho algumas dúvidas. Seguem as perguntas.

1- Há quanto tempo você está no Doutorado?

2 - A análise in vitro utilizando MCF7 foi através de qPCR. Não seria necessária a avaliação proteica para afirmar um fenótipo triplo negativo nesta linhagem?

3- Vocês pretendem avaliar o efeito de 5-HT em uma linhagem com fenótipo mais agressivo, como MDA-MB-231 ou outra?

4- Como vocês pretendem validar as alterações fenotípicas induzidas por 5-HT e por fluoxetine?

Obrigada

Paloma Souza