Boa tarde Mariana,

Meus parabéns pelo trabalho, gostei muito da sua apresentação. Você fez análises in silico para determinar os possíveis alvos moleculares de C-PC e verificou que esta proteína se liga a algumas proteínas relacionadas à proliferação, apoptose, migração e metástase; e verificou também que esses efeitos funcionais ocorrem, através de alguns experimentos in vitro. O que mais você faria para corroborar esses experimentos in vitro? Quais são as perspectivas desse trabalho?

* Vocês viram que o C-PC não se liga à p53 e, além disso, ele se liga a BCL-2, entretanto os ensaios in vitro mostraram que C-PC não induz morte celular. O que você acha que pode estar acontecendo? 

* O que é a célula controle? É tratada com algum reagente?

* Essa molécula C-PC já é utilizada em algum ensaio clínico como agente anti-tumoral em algum modelo? E em ensaios in vivo, há estudos que utilizam a P-CP em camundongos? Se sim, sabe a concentração utilizada in vivo? Essa concentração de 400 ug/mL é viável?

* No gráfico A do ensaio de sensibilidade da célula tumoral B16F10 ao P-CP, ficou faltando o asterisco indicando diferença estatisticamente significativa entre o controle e a célula tratada com 400 ug/mL em 72h, ou não colocou porque não há diferença significativa? No próprio abstract você chama a atenção para esta concentração...

* Como você sabe que essas interações proteína-proteína (in silico) entre C-PC e BRAF, MEK1, BCL-2, CDK6 etc... bloqueiam as ações dessas proteínas? 

* Como foi feita exatamente a contagem das células com a exclusão com azul de tripan? As células estavam aderidas? Como você extrapolou essa contagem para todo o poço?

* Como pretendem validar os experimentos com as metaloproteinases?

Boa tarde, Mariana!

Parabéns pelo trabalho. Como em sua apresentação você diz que o C-FC se liga às MMP -2 e -9  e aqui nas perguntas vi que você pretende analisar essas proteínas a nível de RNA e expressão protéica, pensei que talvez seria interessante avaliar a atividade dessas MMPs.

Abraço