Boa tarde Mariana,

Meus parabéns pelo trabalho, gostei muito da sua apresentação. Você fez análises in silico para determinar os possíveis alvos moleculares de C-PC e verificou que esta proteína se liga a algumas proteínas relacionadas à proliferação, apoptose, migração e metástase; e verificou também que esses efeitos funcionais ocorrem, através de alguns experimentos in vitro. O que mais você faria para corroborar esses experimentos in vitro? Quais são as perspectivas desse trabalho?

* Vocês viram que o C-PC não se liga à p53 e, além disso, ele se liga a BCL-2, entretanto os ensaios in vitro mostraram que C-PC não induz morte celular. O que você acha que pode estar acontecendo? 

* O que é a célula controle? É tratada com algum reagente?

* Essa molécula C-PC já é utilizada em algum ensaio clínico como agente anti-tumoral em algum modelo? E em ensaios in vivo, há estudos que utilizam a P-CP em camundongos? Se sim, sabe a concentração utilizada in vivo? Essa concentração de 400 ug/mL é viável?

* No gráfico A do ensaio de sensibilidade da célula tumoral B16F10 ao P-CP, ficou faltando o asterisco indicando diferença estatisticamente significativa entre o controle e a célula tratada com 400 ug/mL em 72h, ou não colocou porque não há diferença significativa? No próprio abstract você chama a atenção para esta concentração...

* Como você sabe que essas interações proteína-proteína (in silico) entre C-PC e BRAF, MEK1, BCL-2, CDK6 etc... bloqueiam as ações dessas proteínas? 

* Como foi feita exatamente a contagem das células com a exclusão com azul de tripan? As células estavam aderidas? Como você extrapolou essa contagem para todo o poço?

* Como pretendem validar os experimentos com as metaloproteinases?

Boa tarde Thayssa,

Parabéns pelo trabalho bastante promissor, tem resultados muito interessantes. Explica um pouco melhor, por favor, esse resultado da Figura 2, essa comparação entre a LNCaP e a PC3. A PC3 também não é tempo-dependente? Qual das duas células você considera que tem um resultado mais interessante e por quê? (levando em consideração que a LNCaP é hormônio-dependente e a PC3 hormônio independente).

Quais são os próximos passos do trabalho? Vocês pretendem explorar os mecanismos pelos quais o LQB-472 age na célula?

Boa tarde Isabel,

* Parabéns pelo trabalho! Em relação à figura 1, qual foi o controle utilizado para esses ensaios de MTT?

* Qual foi a concentração utilizada nos experimentos de ciclo celular (Figura 2)?

* Ao que você atribui essa variabilidade das espécies nas três coletas diferentes? Qual foi o período de coleta e como pode afetar a ocorrência das espécies?

* A atividade anti-tumoral da A. halophytica foi eficiente na célula de câncer de mama somente ou na célula de mama e na de glioblastoma também? Qual célula MDA é essa? Especifique, por favor.

* Essa variabilidade química avaliada significa que os compostos são o que, exatamente? Metabólitos das cianobactérias com atividade anti-tumoral? Vocês pretendem avaliar/validar quais desses compostos (isolados ou em combinação) são os responsáveis pelos efeitos anti-tumorais? Vocês pretendem escolher um modelo de câncer para seguir com o trabalho?