A bactéria Salmonella typhimurium tem sido estudada para o desenvolvimento de vacinas contra diferentes agentes patogênicos com resultados bastante promissores. No entanto, apesar do uso frequente de S. typhimurium nestas pesquisas, pouco se sabe sobre as condições ótimas para o cultivo destas células em regime de alta densidade, o que é necessário para viabilizar a produção destas vacinas em larga escala. Neste trabalho foi feito o estudo da cinética de crescimento de S. typhimuium em 12 formulações de meio de cultivo, com o objetivo de encontrar a melhor composição que permitisse combinar alto acúmulo de biomassa e baixa produção de acetato. Foram realizados quatro conjuntos de experimentos, em duplicata, combinando três fontes de carbono (glicose, glicerol e xilose) com quatro fontes de nitrogênio complexas (triptona, extrato de levedura, soytone e phytone). Os cultivos foram realizados em frascos agitados a 250 rpm e 37ºC, e as amostras coletadas foram analisadas por turbidimetria e HPLC. Entre as fontes de carbono, a glicose permitiu atingir os maiores valores de µmax, porém levou à formação de concentrações inibitórias de acetato. As fontes de nitrogênio de origem vegetal (soytone e phytone) combinadas com xilose ou glicerol favoreceram um crescimento balanceado das células, com menor acúmulo de acetato e maior formação de biomassa. Em comparação com a condição controle (glicose + triptona), a formulação contendo o phytone combinado ao glicerol apresentou os melhores resultados, com um ganho de 40 % na produção de biomassa e redução de 45 % no acúmulo de acetato.