As enzimas possuem uma ampla aplicação em processos biotecnológicos, atuando na elaboração de produtos alimentícios, farmacêuticos, cosméticos e na recuperação de resíduos. Destacam-se dentre as enzimas lipolíticas, as lipases e esterases. Portanto o objetivo desse trabalho foi avaliar a capacidade da levedura Aureobasidium pullulans isolada de resíduos agroindustriais na síntese de esterases (E.C. 3.1.1.3). A fermentação submersa foi realizada utilizando 1 % de azeite de oliva como indutor da produção de esterases a partir da cepa de Aureobasidium pullulans (isolada da palha de cana de açúcar). Foram realizados testes de atividade enzimática a partir dos substratos p-nitrofenol butirato e p-nitrofenol caprilato. A atividade máxima obtida com o substrato butirato foi de 35 U/mL em 144 horas de fermentação e em substrato caprilato, a atividade máxima de 15 U/mL foi obtida em 96 h de processo. Portanto a levedura foi capaz de atuar em substratos de cadeias curtas (< 10 carbonos), apresentando valores de enzimáticos promissores para esterases.