Produção e Caracterização dos Exopolissacarídeos da Bactéria Gluconacetobacter diazotrophicus
Introdução: Gluconacetobacter diazotrophicus (GD) é uma bactéria fixadora de nitrogênio encontrada nas raízes de algumas plantas como cana-de-açúcar, milho, arroz, batata-doce, entre outras. Esta bactéria pode ser encontrada endofiticamente, num processo de interação planta-bactéria que exige a presença de exopolissacarídeos (EPS). O objetivo deste trabalho é avaliar a produção de EPS em 7 estirpes de GD isolados de diferentes plantas, bem como caracterizar estruturalmente estes polímeros. Métodos: Após o crescimento das bactérias, a quantificação de EPS foi realizada para verificar quais estirpes eram mais produtoras em relação ao crescimento celular. O isolamento dos EPS se deu após precipitação etanólica do meio livre de células, seguido por diálise e liofilização. Após a hidrólise dos EPS (TFA 1M, 100oC, 8h), a composição monossacarídica de cada material foi analisada por cromatografia de camada delgada (TLC) e, posteriormente, confirmada por GC-MS, através dos derivados alditol acetatos obtidos após redução e acetilação do material previamente hidrolisado. Análises dos derivados alditol acetato parcialmente metilados (PMAA), também foram realizadas para determinar os tipos de ligações glicosídicas encontradas. Para observar as características da estrutura fina dos EPS, 5 mg foram dissolvidos em 0,4 mL de óxido de deutério (D2O) e analisados por RMN. Resultados: Dentre as estirpes analisadas, PBD4 foi a que apresentou maior produção de EPS em relação ao crescimento bacteriano (40,14 mg de EPS por mg de proteínas totais). A menor relação EPS:proteína (7,36 mg/mg) foi observada para a estirpe Ppe4. A análise da composição monossacarídica por TLC mostrou a presença de ácidos urônicos na estrutura do EPS, observada pelas bandas de menor Rf, além de Man, Glc e Gal, sendo estes posteriormente quantificados por GC-MS: 35%, 50% e 15%, respectivamente. Conclusões: Um padrão estrutural pode ser observado nos EPS de GD, podendo este ser importante para o processo de interação planta:bactéria.