Efeito do Tempo na Ativação de Bucha Vegetal com Trimetafosfato de Sódio para Imobilização de β-glicosidase de Soja

Introdução: A imobilização de enzimas é alternativa para utilização industrial de enzimas com vantagens como reutilização, redução dos custos e ausência da enzima no produto final. A bucha vegetal tem sido pesquisada como suporte atóxico e para aumentar a eficiência de imobilização de enzimas, pode se utilizar ativadores. O trimetafosfato de sódio (TMS) é atóxico e pode ser utilizado como ativador, sendo que até o momento não há estudos sobre a ativação de bucha vegetal com TMS. Assim, o objetivo do trabalho foi testar o efeito do tempo na ativação de bucha vegetal com TMS para imobilização de β-glicosidase. Métodos: A β-glicosidase foi extraída de farinha de cotilédones de soja com tampão fosfato de sódio 100 mM, pH 6,6 para obtenção do extrato bruto (EB) que foi fracionado com sulfato de amônio (40–85% de saturação a 4 °C). Foram adicionados 50 mL de TMS 30 % em 4 pedaços de bucha vegetal e mantidos em shaker a 25 ͦC, por 30, 60 e 120 min. Os suporte ativados com TMS foram incubados com 50 mL extrato de enzima (2,35 x 10-3 UA mL-1) por 24 h, agitação lenta para imobilização. A eficiência de imobilização (%) foi expressa como (atividade específica inicial da enzima – atividade específica após o período de incubação/atividade específica da enzima inicial) × 100. A atividade foi determinada com substrato ρ-nitrofenil-β-d-glicopiranosídeo (ρ-NPG) e o teor de proteínas, com padrão de albumina de soro bovino. Os experimentos foram realizados em triplicata. Resultados: A atividade da enzima nos suportes ativados por 30, 60 e 120 min, foi de 3,05 x1 0-3, 2,56 x10-3 e 2,45 x 10-3 UA mg-1 de proteínas, correspondendo a 22, 16 e 10 % da atividade inicial de enzima adicionada. Conclusões: O menor tempo de incubação enzima-ativador apresentou maior eficiência de imobilização β-glicosidase.