Efeito da Agitação sobre a Produção de Enzimas Lipolíticas de Penicillium sp

Introdução: Vários fatores ambientais podem afetar o crescimento microbiano e por conseqüência a produção de enzimas. Entre estes pode-se destacar a concentração de oxigênio dissolvido relatada em vários estudos como um fator positivo para a produção de enzimas e que está diretamente relacionado com a agitação dos meios de cultivo. O objetivo deste trabalho foi estudar a influência da agitação sobre a produção de lipases por um isolado de Penicillium sp. Métodos: Culturas estoque do fungo repicadas em BDA e incubadas a 28oC por até 7 dias foram usadas como inóculo através de uma suspensão de conídios produzida com salina estéril e 0,1% de Tween 80. Para produção de enzimas lipolíticas foi inoculado aproximadamente 5x106 conídios/mL de suspensão, em frascos Erlenmeyer 125 mL contendo 25 mL de sais de Vogel e 1% de óleo de oliva. O fungo foi cultivado a 28oC por 11 dias sob condições estáticas e por 5 dias sob agitação a 120 rpm. O extrato bruto enzimático (EBE) obtido após filtração a vácuo dos cultivos foi utilizado para determinação da atividade lipase através da incubação, por 10 min a 40OC, de 0,3 mL do EBE com 0,7mL de palmitato de p-nitrofenila em meio tamponado de TRIS-HCl 50mM pH8,5. Uma unidade de lipase foi definida como a quantidade em µM de p-nitrofenol liberado por mim por mL de enzima. O crescimento microbiano foi avaliado pelo peso da biomassa úmida. Resultados: A fermentação sob agitação resultou numa produção de lipases (150,33U/mL), duas vezes maior que a produção sob condições estáticas (61.55 U/mL). A biomassa dos cultivos estáticos foi escasso e o peso não foi determinado e dos cultivos agitados atingiu 656.9 mg. Conclusões: Em suma, os melhores resultados foram alcançados com a condição agitada na qual a captação do oxigênio é favorecida.