Caracterização Bioquímica das Xilanases Produzidas por Trichoderma harzianum CH14

Introdução: As xilanases são as principais enzimas xilanolíticas amplamente utilizadas pelas indústrias alimentícia, de ração animal, de polpa e celulose. Devido a seu imenso potencial, pesquisas com xilanases que apresentem propriedades mais adequadas às aplicações industriais vêm sendo realizadas. O objetivo desse trabalho foi estabelecer as propriedades bioquímicas das xilanases produzidas por uma linhagem de Trichoderma harzianum. Métodos: O fungo T. harzianum foi crescido em meio líquido de Vogel, suplementado com 1,1% de casca de maracujá, pH 4,2, por 8,6 dias. Após filtração à vácuo, o filtrado obtido foi empregado como fonte de xilanases extracelulares. A atividade xilanásica foi determinada por meio da incubação do filtrado de cultura em meio tamponado com 1% de xilano de madeira de faia, seguida pela determinação de açúcares redutores. O pH e a temperatura ótimos de atuação das xilanases produzidas foram avaliados por meio do Delineamento Central Composto Rotacional e as respostas das atividades foram analisadas pela Metodologia de Superfície de Resposta. A estabilidade térmica das xilanases foi avaliada em sua temperatura ótima de atuação. Após a incubação do filtrado de cultura sem substrato, alíquotas foram retiradas em intervalos de tempo variados, para determinação das atividades residuais. Para a determinação da estabilidade em diferentes valores de pH, o filtrado de cultura foi incubado a 4 °C em tampão McIlvaine na proporção de 1:2 (v/v). Após 24 horas de incubação, a atividade residual foi determinada. Resultados: As condições estabelecidas como ótima para a atuação das xilanases produzidas foram 50 °C e o pH 5,0. Ainda, essas enzimas demonstraram boa estabilidade frente aos valores de pH 4,0-7,0, enquanto foram pouco estáveis em sua temperatura ótima, apresentando uma T1/2 de aproximadamente 17 minutos. Conclusões: As características exibidas pelas xilanases de T. harzianum evidenciam seu potencial de aplicação em alguns processos industriais, como sua adição em rações animais.