Avaliação Molecular de Plantas do Porta-enxerto Citrange Carrizo Transformadas com o Gene da Atacina A Visando Resistência a Doenças Microbianas

Introdução: A citricultura tem grande importância econômica para diversos países, como Brasil, Estados Unidos, China e outros que compõem a União Europeia. Apesar da grande importância econômica, o setor citrícola enfrenta diversos problemas de ordem fitossanitária, como as doenças cancro cítrico, clorose variegada dos citros (CVC) e Huanglongbing (HLB). Em função de limitações do melhoramento genético convencional para a cultura, a transformação de plantas cítricas utilizando técnicas biotecnológicas pode contribuir para o desenvolvimento de cultivares com resistência a essas doenças microbianas. Assim, os objetivos deste estudo foram confirmar a transformação de plantas do porta-enxerto citrange ‘Carrizo’ (Poncirus trifoliata (L.) Raf. X Citrus sinensis (L.) Osbeck) com o gene attA isolado da hemolinfa de Trichoplusia ni que codifica o peptídeo com atividade antimicrobiana Atacina A e verificar a expressão desse gene nas plantas transgênicas. Métodos: A transformação das plantas cítricas foi realizada com a linhagem desarmada de Agrobacterium tumefasciens EHA-105 contendo o vetor binário pCattA 2300, utilizado para transformação com o gene attA sob controle do promotor e terminador CaMV 35S, duplicado. A presença do gene attA no genoma das plantas cítricas foi determinada pela técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR), utilizando iniciadores específicos. A transcrição do gene antimicrobiano também foi determinada pela técnica de PCR, utilizando cDNA sintetizado a partir de RNA total extraído das plantas cítricas. Resultados: A presença do gene attA foi confirmada em sete eventos de citrange Carrizo e a expressão desse gene nos eventos transgênicos está sendo analisado, tanto na parte aérea como nas raízes das plantas cítricas. Conclusões: Plantas do porta-enxerto citrange ‘Carrizo’ são passíveis de serem transformadas via A. tumefasciens com genes que codificam peptídeos antimicrobianos e esses genes apresentam viabilidade para serem incorporados no genoma vegetal de plantas cítricas para serem expressos