Seleção de Mutantes de Aspergillus welwitschiae para Produção de Ácido Cítrico

Introdução: O ácido cítrico (AC) é um produto do metabolismo primário de grande aplicabilidade industrial. A produção industrial deste ácido orgânico tem sido feita por linhagens de Aspergillus niger. No entanto, outras linhagens de Aspergillus seção Nigri podem ser utilizadas para produção de AC. A. welwitschiae, espécie morfologicamente idêntica a A.niger, apresenta grande potencial para produção de enzimas hidrolíticas e ácidos orgânicos. Neste sentido, este estudo tem por objetivo obter linhagens mutantes de A.welwitschiae para maior produção de ácido cítrico. Métodos: A linhagem selvagem de A.welwitschiae UELAs 15.262, foi previamente caracterizada quanto a ausência de potencial de produção de ocratoxina A e fumonisina B2. Inicialmente, suspensões de 10^2 e 10^5 conídios foram plaqueadas em meio de Foster, característico para produção de ácido cítrico e expostas a radiação UV em intervalos de tempo de 15 a 60 minutos. Após a exposição à radiação UV, as placas foram incubadas a 28ºC por 4 dias e Unidades Formadoras de Colônias (UFCs) foram utilizadas para a construção da curva de sobrevivência. Os mutantes selecionados foram submetidos a sucessivas passagens em meio Foster. A produção de AC, tanto pela linhagem selvagem quanto mutantes, foi avaliada com auxílio do Índice Enzimático (IE). Resultados: Os resultados obtidos, permitiram verificar que não foi possível a construção da curva de sobrevivência com o uso de 10^5 conídios, devido ao fato de ter muitas UFCs no segundo dia de incubação. No entanto, foi observado menor número de UFCs com o aumento do tempo de exposição à radiação UV, sendo possível selecionar algumas UFCs mutantes (35 minutos de exposição) que apresentaram maior IE em relação à linhagem selvagem. A curva de sobrevivência construída com as placas expostas à radiação UV e que continham 10^2 UFCs, permitiu verificar menor número de UFCs com maior tempo de exposição à radiação UV (100% linhagem selvagem versus 2,5% linhagens mutantes – 4 dias de incubação/60 minutos de exposição a UV). A UFC mutante selecionada com maior IE foi obtida com 30 minutos de exposição a UV. De um total de 9 UFCs mutantes selecionadas, todas apresentaram estabilidade quanto a produção de AC por quatro gerações sucessivas. Conclusão: Com este estudo, foi possível obter UFCs mutantes de A. welwitschiae, aptas a maior produção de AC em relação à linhagem selvagem. A UFC mutante com o maior IE para produção de AC e mais estável, foi obtida com 30 minutos de exposição à radiação UV.