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Introdução: O ácido cítrico (AC), um intermediário do ciclo de Krebs, pode ser produzido por fungos pelo método fermentativo. A fabricação industrial do AC, pode ser realizada por três métodos: o Processo Koji, a Fermentação em Superfície e a Fermentação Submersa, sendo essa última a mais utilizada. Na indústria biotecnológica, a espécie amplamente utilizada é Aspergillus niger, pertencente à seção Nigri. Entretanto outras espécies da seção Nigri, como Aspergillus welwitschiae, possui potencial para a produção de enzimas hidrolíticas e ácidos orgânicos. Neste sentido, o objetivo deste estudo foi verificar as melhores condições de produção do AC por linhagens de A. welwitschiae, previamente selecionadas. Métodos: A partir de um Delineamento em Blocos Casualizados (DBC), as linhagens UEL As 20.290 e UEL As 15.262, foram as melhores produtoras de AC. Posteriormente, as linhagens UEL As 20.290 e UEL As 15.262, foram submetidas ao Delineamento Central Composto Rotacional (DCCR) em meio Foster, para seleção de parâmetros abióticos adequados à produção de AC (35º C e pH 4,2). A linhagem UEL As 15.262 foi selecionada para avaliações posteriores, visto que ela também é uma ótima produtora enzimática. Após seleção dos parâmetros abióticos, a linhagem UEL As 15.262 foi submetida à Fermentação Submersa sob duas condições de cultivo, com modificações: meio de cultivo de Foster (condição 1) e meio de cultivo de Prescott e Dunn (condição 2). As condições do meio de cultivo foram: acréscimo de 0,2% de ágar, 107 conídios, 100 rpm, 35º C, pH 4,2 durante oito dias de cultivo. A produção de AC foi avaliada por identificação do AC, via piridina, quantificação do AC por titulometria e por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE). Resultados: Na condição 1, a maior produção de AC foi detectada com 5 dias de fermentação (piridina: 0,029 g/L; titulação: 1,60 g/L; e CLAE: limite não detectado). Na condição 2, a maior produção de AC foi detectada com 8 dias de fermentação (piridina: 8,36 g/L; titulação: 8,65 g/L e CLAE: 7,67 g/L). Conclusão: Por meio deste estudo, foi possível concluir que se obteve maior produção de AC por UEL As 15.262 sob os parâmetros selecionados associados à condição 2 de cultivo e verificar a diferença entre as técnicas empregadas para a quantificação de AC.
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