Caracterização do Perfil Metabólico do Kombucha Comercial por UHPLC-ESI-MS/MS e Molecular Networking

Introdução: O kombucha é produto de um chá fermentado da simbiose de vários microrganismos. O SCOBY (do inglês, symbiotic culture of bacteria and yeast) é composto por bactérias do ácido acético, bactérias lácticas e leveduras responsáveis por diversas reações bioquímicas. O produto final é constituído por uma complexidade de substâncias, que são produzidas de acordo com fatores como: o substrato utilizado, o inóculo, suas respectivas concentrações, além das condições estabelecidas na cinética do processo. Os benefícios do kombucha ainda são poucos conhecidos, uma vez que há pouca ou nenhuma informação sobre a caracterização de seus componentes bioativos. O emprego da cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas (UHPLC-MS/MS) em conjunto com ferramentas de bioinformática como Molecular Networking (MN) e a plataforma do The Global Natural Product Social Molecular Networking (GNPS) auxiliam na caraterização/identificação desses compostos e de supostos análogos a partir dos dados obtidos. Em vista disso, o estudo proposto buscou caracterizar/identificar as substâncias encontrados em amostras de kombucha comercial. Métodos: As bebidas comerciais foram compradas em mercearias locais. As amostras foram submetidas à extração em fase sólida. Em seguida, foram analisadas por cromatografia líquida de ultra eficiência, utilizando um cromatógrafo nexera X2 (Shimadzu, Japão) acoplado a um espectrômetro de massas de alta resolução Impact II (Bruker Daltonics Corporation, Alemanha) equipado com uma fonte de ionização por electrospray. A coluna utilizada para a separação cromatográfica foi Acquity UPLC® CSH TM C18 (Waters, EUA), tamanho de partícula de 1,7 μm, com 2.1x100 mm e fluxo de 0,20 mL min-1. Resultados: A análise permitiu a distinção de 241 entidades químicas associadas a bebida fermentada. Desse total, 46 compostos foram identificados com auxílio de banco de dados presentes no GNPS. A constituição do kombucha demonstrou ser variada; alguns aminoácidos e outros compostos orgânicos foram observados. Além disso, metabólitos da classe dos flavonoides, como quercetina e procianidina, também foram identificados pela análise. As análises por UHPLC-MS/MS, associadas à ferramenta MN não estão totalmente finalizadas, porém os resultados preliminares permitem uma identificação dos metabólitos encontrados no kombucha comercial. Conclusões: A análise do kombucha por UHPLC-MS/MS e MN promoveram uma investigação metabolômica ampla, auxiliando na detecção e identificação de compostos associados à bebida. Além disso, esse tipo de análise irá contribuir para compreensão do perfil metabólico do chá fermentado, bem como auxiliar na descoberta de novos compostos biologicamente ativos.
Agência de fomento: Capes, Finep, CNPq, Fundação Araucária