CARACTERIZAÇÃO FILOGENÉTICA DE DERMATÓFITOS ISOLADOS EM CÃES E GATOS

A dermatofitose é uma infecção fúngica de caráter zoonótico, sendo considerada uma doença de importância para a saúde pública e animal, que acomete a camada córnea dos animais. Os gêneros causadores da dermatofitose são: Epidermorphyton, Microsporum e Trichophyton, sendo o M. canis o dermatófito zoofílico mais isolado em cães e gatos. O diagnóstico é realizado a partir de exames como: lâmpada de Wood, citologia, cultura fúngica e PCR. Este trabalho teve como objetivo investigar o perfil genético de dermatófitos em cães e gatos por meio de ferramentas de epidemiologia molecular. Foram coletadas amostras de pelos e crostas de cães e gatos, atendidos no (HVU) e clínicas veterinárias em São Luís- MA. Foram realizadas coletas para exames citológicos sob as afecções, as amostras clínicas foram cultivadas em placas contendo Ágar DTM incubadas a 25-30ºC, e posterior realizado a microscopia das colônias fúngicas para identificação do agente etiológico. Para caracterização molecular e filogenética o DNA foi extraído da cultura fúngica, com o protocolo Fenol-Clorofórmio-Álcool Isoamílico, os produtos da PCR foram purificados e sequenciados. A análise filogenética das sequências de M. canis foram obtidas através do banco de dados do GenBank. Foram coletadas 43 amostras (31 cães e 12 gatos), sendo que em 34 obteve-se crescimento fúngico. Os gêneros de fungos isolados das lesões cutâneas foram: Curvularia spp. em 5 casos, Aspergillus spp. em 5 casos, fungo saprófita de gênero não identificado em 7 casos, M. canis em 16 casos (sendo 7 positivas em cães e 9 em felinos), e Nannizzia gypsea (prev. M. gypseum) com 1 caso. Nove amostras não apresentaram crescimento fúngico. Com a obtenção de 17 isolados positivos para dermatofitose, foi realizada a extração do DNA e PCR convencional, apresentando 700 pares de bases somente em 10 amostras, que posteriormente foram submetidas ao sequenciamento. A análise BLAST de sequências da região ITS1-5.8S-ITS2 dos isolados, revelou que somente em 3 amostras apresentavam semelhança para sequências de DNA ribossômico de M. canis, mostrando 100% de similaridade e 97% de identidade. A análise filogenética das amostras, gerou uma árvore com topologia similar, com sequências de M.canis com índices de boostrap de 100 e 90% nas análises realizadas. Sendo assim, a principal espécie causadora de dermatofitose em cães e gatos identificado foi M. canis, obtendo a confirmação do diagnostico através da cultura fúngica e posterior PCR convencional. Apesar de poucas amostras obterem sequencias de qualidade através da região ITS1-5.8S-ITS2, a análise mostrou-se eficiente na identificação, demonstrando a necessidade da realização de outras análises moleculares, a fim de se observar a variabilidade genética interespecífica dos gêneros causadores da dermatofitose.