Avaliação da citotoxicidade e atividade anti-inflamatória e antioxidante do eugenol em neutrófilos humanos

Introdução: O eugenol, também conhecido como ácido eugênico ou cariofílico, é um fenol monoterpenóide derivado do fenilpropano. É uma substância aromática natural farmacologicamente muito ativa presente nos óleos essenciais de algumas plantas do Nordeste brasileiro como cravo, canela e alfavaca. Algumas das propriedades farmacológicas podem ser atribuídas à sua estrutura fenólica, como a atividade anestésica e efeito bactericida. Estudos também têm mostrado atividade antifúngica, anticarcinogênica e antialérgica. Objetivo: Avaliar a citotoxicidade atividade anti-inflamatória e antioxidante do eugenol em neutrófilos humano. Metodologia: Polimorfonucleares (2,5 x 106células/mL), predominantemente neutrófilos (80-90%) com viabilidade celular de 95% (técnica de exclusão de azul de Tripan) foram isolados a partir de subproduto de sangue humano e incubados (37ºC) com EUG (5, 10, 25, 50 e 100 µg/mL), DMSO (controle), Triton X-100 0,2% (padrão citotóxico) ou HBSS (células não tratadas). A citotoxicidade foi avaliada pelo teste do MTT. Para a avaliação da atividade anti-inflamatória foi medida a liberação da enzima mieloperoxidase (MPO) no sobrenadante de neutrófilos estimulados com PMA (0,1μM) e incubados com EUG (1, 10, 50, 100 μg/mL), HBSS (controle negativo), indometacina (INDO, 35, 7μg/mL, fármaco-padrão) ou DMSO (controle positivo). A atividade antioxidante foi determinada utilizando o teste de quimioluminescência (QL). Neutrófilos (2.5x106 células/ml) foram pré-incubados a 37°C por 30 minutos na presença de (5, 10, 25, 50 e 100 µg/mL), HBSS (controle negativo), quercetina (Querc, 25μg/mL, fármaco-padrão) ou DMSO (controle positivo) e a sonda lucigenin (luc, 150 mM). Foram estimulados com a PMA e acompanhada a produção de QL em cpm (número de fótons por minuto) durante 20 minutos a 37 ° C. Os resultados foram expressos como média ± erro padrão da média. Resultados/discussão: Os resultados mostraram que EUG (5, 10, 50 e 100 µg/mL) não promoveu redução significativa da viabilidade celular (96,03 ± 2,52; 95,87 ± 2,63; 97,76 ± 2,64; 94,59 ± 2,13 %; respectivamente) em relação ao grupo controle (DMSO 1%: 97,86 ± 2,34 %). O EUG (1, 10, 50, 100 μg/mL) reduziu a desgranulação neutrofílica através da inibição da liberação de MPO em até 84,40 ± 0,54% e também induziu uma redução significativa na produção de espécies reativas de oxigênio (EROs) marcado pela QL luc em até 51,4 ± 2,2%, comparável a quercetina, desde a concentração de 1 μg/mL. Conclusão: O EUG apresentou atividade anti-inflamatória e antioxidante em neutrófilos humano, no entanto são necessários estudos adicionais para comprovar esses efeitos e determinar seu mecanismo de ação.