Atividade antibiofilme da violaceína sobre Staphylococcus epidermidis

Introdução: S. epidermidis é encontrado no epitélio humano, principalmente na região de axilas, cabeça e narinas, apresentando função probiótica. Apesar disso, em virtude da expressão de vários fatores de virulência e da sua capacidade de colonizar diferentes superfícies pela formação de biofilmes, este patógeno é considerado um preocupante causador de infecções relacionadas à assistência à saúde. Os biofilmes consistem em aglomerados multicelulares de bactérias em superfícies, com incorporação de uma matriz extracelular, que confere proteção para a bactéria contra os mecanismos de defesa do hospedeiro e contra agentes antimicrobianos. É importante o estudo de bactérias formadoras de biofilmes porque essas são cerca de 100 a 1000 vezes mais resistentes aos antimicrobianos que as bactérias não formadoras. Objetivos: Determinar a atividade antibiofilme da violaceína (VIO) sobre S. epidermidis. Métodos: Foi utilizado S. epidermidis ATCC 35984, obtido da Coleção de Microrganismos de Referência em Vigilância Sanitária (CMRVC, FIOCRUZ-INCQS, RJ). Foi determinada a concentração inibitória mínima de formação de biofilme (CIMB) (FEMS Microbiol. Lett., 230: 191, 2004), sendo a massa de biofilme quantificada pela técnica do cristal violeta (J. Microbiol. Methods., 40: 175, 2000). Foi determinada também a concentração mínima de erradicação do biofilme (CMEB) e o efeito do tempo de exposição à VIO na viabilidade microbiana em biofilme (Int. J. Antimicrob. Agents., 33: 343, 2009). Os ensaios foram realizados em triplicata e em dois diferentes momentos, sendo os resultados comparados pela análise de variância (ANOVA) e pós-teste de Dunnet. As diferenças foram consideradas estatisticamente significantes quando p<0,05. Resultados: A menor concentração de VIO capaz de inibir a formação do biofilme (CIMB) de S. epidermidis foi de 20μg/mL. Em biofilme já formado, a menor concentração de VIO capaz de erradicar completamente o crescimento microbiano (CMEB) foi de 160μg/mL. Apesar disso, concentrações iguais a 1/2 x CMEB, 1/4 x CMEB e 1/8 x CMEB da VIO foram capazes de reduzir, respectivamente, em 4,8log10 UFC/mL, 3,8log10 UFC/mL e 1,5log10 UFC/mL a viabilidade do biofilme bacteriano em comparação ao controle sem tratamento. Na avaliação do efeito do tempo de exposição à VIO na viabilidade microbiana em biofilme já formado, em concentração equivalente à 1/2 CMEB, não houve erradicação do biofilme microbiano, entretanto, com 6h de incubação houve redução de 4log10 UFC/mL em comparação ao controle (sem tratamento). Em concentrações iguais à CMEB e à 2x CMEB houve erradicação do biofilme em 3h e 2h30min de incubação, respectivamente. Portanto, a velocidade de erradicação do biofilme já formado é dependente da concentração da VIO. Conclusão: A VIO apresentou boa atividade sobre biofilme de S. epidermidis, mas foram necessárias concentrações elevadas para erradicação bacteriana em biofilme já formado. Apesar disso, concentrações menores que a CMEB foram capazes de reduzir significativamente (redução ≥2log10 UFC/mL) a viabilidade celular do biofilme. Apoio Financeiro: Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) e Universidade Federal do Ceará (UFC).