CARACTERIZAÇÃO ESTRUTURAL DA CO-CHAPERONA Hsp40-Sis1

Proteínas são macromoléculas constituídas por aminoácidos, desempenham um papel essencial para todos os seres vivos, visto que quase todas as atividades em sistemas biológicos se dão através dessas moléculas. Para desempenharem corretamente sua função, as proteínas precisam adotar uma estrutura tridimensional específica (forma enovelada ou nativa). Se isso não acontecer essas proteínas perdem a função e podem também participar de processos que levam a diversas tais quais neurodegenerativas e alguns tipos de câncer. Portanto, as células contam com um sistema de controle de qualidade mediado por uma classe de proteínas denominadas “chaperonas” que reconhecem proteínas enoveladas incorretamente e as fazem adquirir a sua correta conformação. Uma das principais famílias de chaperonas é a que constitui o sistema Hsp70-Hsp40, que reconhecem as proteínas mal enoveladas e auxiliam o enovelamento correto. Um dos objetivos do nosso grupo é a determinação das estruturas em alta resolução dessas Hsp40, o que é um grande desafio, pois essas proteínas apresentam grande massa molecular, estrutura flexível e interação transiente com as Hsp70. Para tanto, clonamos e purificamos os 3 domínios da Hsp40-Sis1 de Saccharomyces serevisiae: o domínio J, responsável pela interação da Hsp40 com a Hsp70, o domínio central flexível (GM/GF) e o domínio do C-terminal (CTD) responsável pelo reconhecimento de regiões hidrofóbicas (presentes em proteínas mal enoveladas). O trabalho apresenta esses passos e a caracterização inicial desses domínios, sendo os próximos passos a determinação da estrutura de cada um deles por ressonância magnética nuclear (RMN).