Determinação de amoxicilina e seus subprodutos em efluentes por injeção direta em cromatografia líquida de alta performance

Neste trabalho foi desenvolvida metodologia analítica para determinação de amoxicilina e seus subprodutos em efluentes com pequeno volume de amostra a partir de injeção direta em cromatógrafo líquido de alta performance (HPLC). O método para determinação de amoxicilina utilizou detector de arranjo de diodos (DAD) (Agilent, 1290 Infinity II) em 230 nm. São requeridos apenas 100 µL de amostra para quantificação de traços de amoxicilina em efluentes. A faixa linear de trabalho estende-se até 300 µg L-1, com sensibilidade analítica a partir dos 5 µg L-1 e coeficiente de correlação linear (r) de 0,99906. O limite de detecção do método é de 1,5 µg L-1 e o limite de quantificação prático é de 5 µg L-1. A precisão do método foi avaliada a partir da repetitividade com coeficiente de variação de 0,2%. A exatidão foi avaliada pelo teste de recuperação/tendência com 98,4% e erro relativo médio de 1,5%. Os parâmetros avaliados na validação demonstraram que o método apresentou capacidade de quantificação de baixas concentrações, comportamento linear, boa exatidão e precisão constituindo-se uma boa ferramenta para a determinação de amoxicilina sem necessidade de preparo da amostra. Para determinação qualitativa dos subprodutos da amoxicilina, são requeridos 10 µL de amostra que foram injetados diretamente em HPLC acoplado a detector de tempo de voo (TOF) (Agilent, 6550) com fonte de ionização do tipo electrospray (ESI) operada no modo positivo, aplicando-se voltagem de 4000 V e à temperatura de 300 ºC. O módulo de massas foi operado no modo scan, com monitoramento de massas de 50 – 800 m/z. Para os subprodutos de degradação da amoxicilina, foram encontrados três fragmentos, que são produtos de degradação do 4-hydroxyphenylglycil AMX ([C7H8NO]+), do ácido penicilóico ([C6H10NO2S]+) e diketopiperazine amoxicillin ([C10H11N2O3]+).