MÉTODO GENOMAGNÉTICO PARA DETECÇÃO VOLTAMÉTRICA DO DNA DO VÍRUS DA HERPES

O herpes vírus 1 (HSV-1) é o principal causador de diferentes doenças entre elas a encefalite herpética, cujo diagnóstico é realizado por exame clínico e pela técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR)[1]. Assim, um método genomagnético foi desenvolvido para a detecção do DNA do vírus da Herpes empregando partículas magnéticas (PMs) e um dispositivo serigrafado eletroquímico descartável

. Para isto, uma fita dupla de DNA com 120 pares de bases idêntica à do vírus da HSV-1 foi utilizada como alvo para o desenvolvimento do método proposto. Uma sonda de captura (DNA_cap) com 22 pares de bases desenhada e ancorada às PMs para captura e separação da sequência de DNA alvo na amostra. Uma segunda sonda para detecção (DNA_detec) com 21 pares de bases foi ancorada em nanopartículas de ouro (AuNPs). A detecção do alvo envolveu a formação do bioconjugado PMs-DNA_cap/Alvo/DNA_det-AuNPs e este foi adicionado ao eletrodo descartável sem modificação contendo um imã posicionado externamente sob a superfície do eletrodo de trabalho. A detecção foi realizada por voltametria de pulso diferencial (DPV) utilizando AuNPs como marcador eletroquímico. A curva analítica obtida compreendeu uma faixa linear de 1 fmol L^-1 a 5000 pmol L^-1 e limite de detecção de 1 fmol L^-1. Em amostra fortificada foram obtidos valores de recuperação de 100,5% a 107,4%. O método genomagnético desenvolvido foi aplicado em amostras contendo DNA do vírus HSV-1 obtendo-se bons resultados comparando com PCR.