CLONAGEM DE EPÍTOPOS DE E5HPV16 PARA DESENVOLVIMENTO DE VACINASTERAPÊUTICAS

O Papilomavírus humano (HPV) é um vírus de tamanho pequeno, capsídeo icosaédrico, não envelopado e com DNA circular de fita dupla que apresenta tropismo pelo epitélio humano. É reconhecido que a infecção persistente por HPVs de alto risco é a principal causa do câncer de colo uterino, além de outros carcinomas genitais, de esôfago e faringe. A proteína E5 do HPV 16 está associada ao desenvolvimento do câncer cervical, e contribui para a carcinogênese através de diferentes vias. Devido a expressão de E5 nos estágios iniciais da transformação celular, vacinas terapêuticas direcionadas a essa proteína podem prevenir lesões pré-malignas de progredirem para câncer cervical invasivo. Porém, nenhuma estratégia até então foi capaz de causar uma regressão total dos tumores associados ao HPV. O presente trabalho teve como objetivo a clonagem de epítopos da proteína E5 de HPV16 em uma construção denominada E5 multiepítopos (E5-M) como parte de uma estratégia vacinal terapêutica contra o câncer cervical. Uma vez que foi confirmada a clonagem, será realizada a indução da expressão do gene em cultura de células da linhagem Rosetta e avaliação da produção da proteína correspondente, utilizando SDS PAGE e Western-Blot. Posteriormente, as proteínas produzidas e purificadas serão testadas quanto à imunogenicidade em modelos pré-clínicos.