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O Brasil encontra-se em segundo lugar como país que mais utiliza sêmen refrigerado no mundo e possui o quarto maior rebanho equino do mundo. Segundo Voss (1993) os equinos são a espécie possuidora dos menores índices de fertilidade, quando comparada com as demais espécies domésticas. A utilização do sêmen refrigerado de equinos tem sido um alvo de crescente interesse, por permitir a conservação do potencial fertilizante dos espermatozóides por períodos de 24 a 36 horas, permitindo assim uma maior flexibilidade na coleta e no envio do sêmen em um momento mais oportuno. O estabelecimento de um protocolo de resfriamento de sêmen que mantenha alta viabilidade espermática, tem sido alvo de crescente interesse. Este trabalho tem como objetivo determinar os efeitos do processo de resfriamento por 48 horas do sêmen de reprodutores da raça pônei brasileiro na viabilidade espermática, comparando dois diluentes comerciais. Imediatamente após a coleta do sêmen, serão avaliados os parâmetros de concentração, volume, motilidade e vigor. Uma amostra de cada ejaculado será conservada em formol salina para avaliação da integridade de membrana e as patologias maiores e menores (HAFEZ E HAFEZ, 2004). Os ejaculados que atenderem aos padrões mínimos para sêmen a fresco pelo Manual de Andrologia do Colégio Brasileiro de Reprodução Animal de concentração, motilidade e vigor serão processados realizando-se a separação do plasma seminal por meio de filtração, usando Spermfilter® conforme recomendação do fabricante.. Os espermatozóides serão ressuspendidos com um dos dois diluentes de sêmen, BotuSêmen Gold ou BotuSêmen Special ®. Após esse processo as amostras de sêmen serão transportadas para a Universidade Estadual do Norte Fluminense Darcy Ribeiro utilizando o sistema comercial de refrigeração passiva Botutainer®. Após chegada ao laboratório, as amostras, ao atingirem 5°C, serão submetidas a novas avaliações de motilidade, vigor, patologia e viabilidade pelo teste hiposmótico e teste de termo-resistência lento (TTR-L) a cada 12 horas durante 48 horas. Espera-se que os resultados deste projeto permitam definir o melhor diluente comercial e um protocolo de resfriamento de semen possa contribuir com os índices de prenhez após a inseminação artificial na raça ponei brasileiro.
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