Avaliação da produção de citocinas em co-culturas de macrófagos e PBMCs de pacientes portadores de hanseníase a partir da ativação do receptor purinérgico P2X7

A hanseníase é uma doença infectocontagiosa crônica, definida principalmente, por lesões na pele com alteração da sensibilidade. É uma doença silenciosa causada pelo Mycobacterium Leprae ou bacilo de Hansen, é considerada uma das enfermidades mais antigas. A doença é classificada em hanseníase paucibacilar (PB) caracterizada por casos que apresentam até cinco lesões de pele, tendo o predomínio de células T auxiliares CD4+, e citocinas Th1, como IL-2 e IFN-γ. E multibacilar (MB) quando há mais de cinco lesões, com prevalência de células T supressoras, CD8+ e citocinas Th2, como IL-4, IL-5 e IL-10. Os principais sintomas são manchas na pele esbranquiçadas ou avermelhadas com perda e/ou diminuição de sensibilidade ao calor, à dor e ao tato. O receptor purinérgico P2X7 ativa as células e consequente secreção de citocinas, agindo também na indução de morte celular e sua ativação através do ATP extracelular, é importante para controlar as infecções por Mycobacteria. Os polimorfismos no gene P2X7, que codifica o receptor de mesmo nome e é expresso em monócitos, macrófagos, linfócitos, células dendríticas, micróglia e vários outros tipos de células do sistema imunológico, têm sido associados à predisposição ao desenvolvimento de várias desordens. Nosso grupo recentemente mostrou uma associação de risco entre o polimorfismo rs3751143, que confere perda de função do receptor purinérgico P2X7, e o desenvolvimento de hanseníase em estudo caso-controle. Contudo, os efeitos imunológicos que este polimorfismo de P2X7 pode acarretar ao indivíduo no contexto da hanseníase carecem de ser esclarecidos. Este trabalho tem como objetivo correlacionar parâmetros da resposta imune periférica (IFN-γ, IL-4, IL-10, IL-5, IL-2, IL-13, IL-17, IL-23, TNF-α e outras) de pacientes e controles, com os diferentes genótipos do polimorfismo rs3751143 por meio de dosagem de citocinas por ELISA em sobrenadantes de co-culturas de macrófago e PBMC, infectadas com bacilos de M. leprae Thai-53. Até o momento foram selecionados 30 indivíduos previamente genotipados para o polimorfismo. Foi realizado treinamento em separação de PBMC por gradiente Ficoll e em biossegurança nível II para manipulação de M. leprae, com o intuito de adquirir habilidade na manipulação de amostras de pacientes. Um levantamento bibliográfico foi realizado, no qual 50 artigos sobre cultura celular estimulada com M. leprae foram selecionados e analisados, para o conhecimento e enriquecimento teórico na padronização de cultura celular a ser realizado no projeto. Espera-se que os resultados obtidos possam auxiliar no esclarecimento do papel do receptor purinérgico P2X7 frente à infecção por M. leprae.