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O presente trabalho tem como objetivo avaliar a produção de biodiesel a partir do óleo de crambe utilizando a rota de interesterificação aliada ao uso de ultrassom e catálise enzimática. Os experimentos foram conduzidos para avaliar o efeito da temperatura, tempo, razão molar MA (metil acetato)/óleo e percentual de catalisador. A partir dos resultados obtidos constata-se que o acréscimo na temperatura, na faixa experimental avaliada, favorece a reação e os melhores resultados são obtidos em 60 oC. O aumento do rendimento em ésteres foi constatado quando a razão molar MA/óleo passou de 6 para 12, acima de 12 um decréscimo foi observado. O catalisador apresentou alta estabilidade durante 30 horas de utilização, com decréscimo de apenas 10% no rendimento. A utilização do ultrassom apresentou efeito significativo (p<0,05) no rendimento, proporcionando a redução do tempo e/ou percentual de enzima.