PÉPTIDOS BIOACTIVOS DE EISENIA FOETIDA: CITOPROTECCIÓN EN CÉLULAS CACO-2 Y POTENCIAL MECANISMO ANTIOXIDANTE

El estrés oxidativo se produce por el desequilibrio entre especies reactivas de oxígeno y sistemas antioxidantes celulares, generando daño sobre lípidos, proteínas, ADN y otros componentes biológicos. En este contexto, los hidrolizados proteicos constituyen una fuente potencial de péptidos bioactivos con capacidad antioxidante y citoprotectora. El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto citoprotector/citotóxico de un hidrolizado enzimático de lombriz roja californiana (Eisenia foetida) y sus fracciones sobre células Caco-2 diferenciadas sometidas a estrés oxidativo inducido por peróxido de hidrógeno. El hidrolizado fue obtenido mediante hidrólisis con Alcalase 2.4 L y posteriormente fraccionado por ultrafiltración con membrana cerámica de corte molecular de 3 kDa, obteniendo fracciones mayor y menor a 3 kDa. La citotoxicidad y citoprotección se evaluaron mediante el ensayo MTT, mientras que los mecanismos celulares se analizaron por citometría de flujo, determinando especies reactivas de oxígeno, glutatión intracelular, calcio intracelular, distribución del ciclo celular y muerte celular por apoptosis/necrosis. La fracción menor a 3 kDa fue caracterizada por LC-MS/MS y los péptidos identificados se evaluaron mediante acoplamiento molecular frente a Keap1 y mieloperoxidasa. Ninguna de las muestras presentó efecto citotóxico en el rango de 0,025–1 mg/mL. El estrés con H₂O₂ redujo la viabilidad celular aproximadamente 40 %, mientras que la fracción menor a 3 kDa mostró el mayor efecto citoprotector, restaurando la viabilidad celular, reduciendo la acumulación de especies reactivas de oxígeno, preservando los niveles de glutatión y disminuyendo el incremento de calcio intracelular. Asimismo, esta fracción redujo los eventos asociados con apoptosis y necrosis. Se identificaron 28 péptidos, de los cuales cinco presentaron afinidad por moléculas relacionadas con la respuesta antioxidante. El péptido KPEDWDDR mostró las mejores energías de afinidad frente a Keap1 y mieloperoxidasa, sugiriendo un posible mecanismo de acción asociado con la modulación de rutas antioxidantes celulares. Estos resultados evidencian el potencial del hidrolizado de Eisenia foetida, especialmente su fracción menor a 3 kDa, como fuente de péptidos bioactivos con propiedades antioxidantes y citoprotectoras.