Explorando a resposta imune de anfíbios com o uso de técnicas moleculares

Anfíbios tem sido o grupo de vertebrados que mais sofreu com extinções nas últimas décadas. Dentre as diversas causas destas extinções, destacam-se doenças pandêmicas emergentes. Embora o estudo mais aprofundado da reposta imune de anfíbios seja crucial neste contexto, ainda sabemos pouco sobre o tema. Um dos nossos objetivos é desenvolver oligonucleotídeos para quantificar a expressão gênica de moléculas pro-inflamatórias em anfíbios. Além disso, sabemos que o hormônio melatonina apresenta um importante papel imunomodulatório em mamíferos. Novamente, o papel deste hormônio em anfíbios permanece pouco explorado. Sendo assim, nosso segundo objetivo é desenvolver oligonucleotídeos para as enzimas que fazem parte da via de produção da melatonina, como AANAT e ASMT. Para tanto, estamos usando como base, dados provenientes de um transcriptoma feito com sapos (Rhinella marina) que foram submetidos a um desafio imunológico com lipopolissacarídeo (LPS) (Gardner et al., 2018; Developmental and Comparative Immunology: 88; 114-123). Até o momento, confirmamos a amplificação dos seguintes fragmentos de interesse em amostras de baço de sapos da espécie Rhinella schneideri: IL1β (3h e 6h após injeção de LPS), IL6, IL10 e IFNγ (após 6h da injeção de LPS); e a amplificação dos seguintes fragmentos em amostras de baço de sapos da espécie Rhinella icterica: IL1β, IL6 e C1s (após 2h da injeção de LPS). Ainda, a expressão desses genes será testada em amostras de fígado para ambas as espécies de sapo, bem como das enzimas que fazem parte da via de produção da melatonina em amostras cérebro e olhos de rãs (Lithobates catesbeianus).