A tuberculose (TB) continua sendo um grave problema de saúde pública mundial. O principal motivo do ressurgimento da TB no atual cenário é o advento de cepas resistentes aos fármacos existentes no mercado, por isso, faz-se necessário o desenvolvimento de novas alternativas terapêuticas capazes de combater essa enfermidade. Nesse contexto, nosso grupo de pesquisa propôs avaliar o potencial antimicobacteriano de uma série de tioureias planejadas estruturalmente a partir do fármaco de segunda escolha Isoxyl (ISO), que foi escolhido como protótipo devido a sua relevante ação contra cepas resistentes. Então, foram sintetizadas vinte nove substâncias contendo o grupo farmacofórico tioureia presente na estrutura do ISO. De um dos lados da estrutura-base foi introduzido um grupo benzoíla, enquanto do outro lado foram introduzidos grupos com diferentes características estéreo-eletrônicas, como aromáticos, heteroaromáticos e alifáticos, a fim de se avaliar a influência dos substituintes na atividade biológica dessa classe de substâncias. Esses derivados foram devidamente purificados e suas estruturas foram confirmadas por técnicas estectroscópicas. Posteriormente, esses foram avaliados frente à cepa de Mycobacterium tuberculosis ATCC 27294 através do método de microdiluição em caldo, utilizando o agente MTT como indicador de viabilidade celular. Os resultados obtidos mostraram que os dois derivados contendo núcleos heteroaromáticos não apresentaram atividade significativa. Dentre as nove substâncias alifáticas, quatro delas apresentaram valores de concentração inibitória mínima (CIM) entre 87,9 e 423,0µM, onde foi observada uma relação entre o aumento do volume dos substituintes com a atividade biológica. Os melhores resultados foram obtidos com as dezoito substâncias aromáticas, dentre as quais três delas, que possuíam substituintes como cloro, bromo e t-butil na posição 4 do anel, apresentaram valores de CIM variando de 37,3 a 43,0µM. Comparando-se os valores de CIM dessa série com as atividades dos fármacos ISO (CIM = 6,2µM) e Etambutol (CIM = 16,0µM), esses resultados são considerados promissores, pois indicam que a atividade antimicobacteriana desses derivados pode ser otimizada através de futuras modificações estruturais.